《A型肉毒毒素對大鼠涎腺分泌功影響機制的研究》是蔡志剛為項目負責人，北京大學為依託單位的面上項目。
基本介紹
- 中文名：A型肉毒毒素對大鼠涎腺分泌功影響機制的研究
- 項目類別 ：面上項目
- 依託單位 ：北京大學
- 項目負責人：蔡志剛
結題摘要,項目摘要,
結題摘要
腺體分泌過多性疾病是口腔頜面外科領域的臨床常見症，包括流涎症、涎瘺等，給患者生活造成不便並產生嚴重的社會心理問題，傳統治療方法療效不確切或產生明顯副作用，因此迫切需要尋找能夠安全有效抑制腺體分泌的新方法。A 型肉毒毒素（botulinum toxin A，BTXA）是肉毒梭菌產生的一種神經毒素，由於療效好毒副作用少，廣泛用於肌張力障礙和痙攣性疾病的治療。近年來BTXA開始用於治療腺體分泌過多性疾病並初步取得較好療效，但其量效關係、持續時間及作用機制尚不十分明確。本研究旨在探討BTXA對唾液分泌功能的影響及其作用機制，為臨床使用BTXA治療唾液分泌過多性疾病提供指導。課題採用頜下腺導管口插管、改良施墨實驗、分子生物學、雷射共聚焦、流式細胞儀和電鏡等研究方法，在大鼠頜下腺組織水平和體外培養腺泡細胞水平分別進行，研究發現（1）BTXA劑量依賴性抑制大鼠頜下腺唾液分泌，其抑制作用可逆，作用時間持續3-6個月；（2）BTXA導致暫時性腺泡細胞萎縮；（3）BTXA下調突觸相關膜蛋白-25（SNAP-25）表達並使其從腺泡細胞頂側膜向胞漿彌散；（4）腺泡細胞乙醯膽鹼酯酶表達降低而分布不變，提示BTXA抑制神經腺體接頭處乙醯膽鹼的釋放；（5）BTXA通過抑制水通道蛋白5（AQP5）的表達與轉位阻滯水分泌的跨細胞途徑；（6）BTXA對頜下腺細胞有抑增殖促凋亡作用；（7）肌上皮細胞萎縮，失去收縮、傳遞神經衝動功能，導致唾液分泌降低。綜上所述：首先，本課題為臨床使用BTXA治療腺體分泌過多性疾病提供了更為詳盡的實驗依據，證實腺體內注射BTXA是一種可逆性抑制腺體分泌的安全有效的方法。其次，本課題首次明確了BTXA可以通過抑制AQP5表達和轉位阻礙跨細胞途徑水分泌最終導致唾液分泌降低，發現了BTXA抑制唾液分泌的新機制。再次，本課題研究了BTXA對肌上皮細胞的影響以及對腺體增殖和凋亡的影響，為深入探討BTXA影響唾液分泌的機制提供了新方向。
項目摘要
本課題以大鼠為實驗動物，於大鼠腮腺及頜下腺內注射A型肉毒毒素，觀察注射後不同時間腺體的分泌情況變化及分泌液成份變化。收集標本，觀察腺體內的神經末梢及神經突觸變化和腺細胞及肌上皮細胞的形態及超微結構變化。採用RT-PCP和Western Blot的方法檢測腺體組織內乙醯膽鹼、去甲腎上腺素、P物質、血管活性腸肽、γ-氨基丁酸（GABA）等神經遞質mRNA及蛋白的變化，並用放射免疫分析法檢測這些神經遞質於神經突觸的釋放情況。進一步檢測A型肉毒毒素可能抑制最明顯的神經遞質- - 乙醯膽鹼的M受體不同亞型的表達變化。同時檢測A型肉毒毒素使腺細胞發生凋亡的情況以及恢復的時間。通過以上實驗來探討A型肉毒毒素對大鼠腮腺和頜下腺唾液分泌的影響和量效關係，並分析A型肉毒毒素影響唾液分泌的可能機制。本課題的研究成果，可以指導臨床使用A型肉毒毒素來治療唾液分泌過多性疾病。
