5-ALA-納米金脂質體靶向人皮膚鱗狀細胞癌的實驗研究

《5-ALA-納米金脂質體靶向人皮膚鱗狀細胞癌的實驗研究》是依託西安交通大學，由曾維惠擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：5-ALA-納米金脂質體靶向人皮膚鱗狀細胞癌的實驗研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：曾維惠
• 依託單位：西安交通大學

項目摘要

皮膚鱗狀細胞癌是皮膚常見惡性腫瘤，目前除手術切除外，尚無理想的非創傷性、靶向性的治療方法。5-ALA局部光動力治療是近年開展的皮膚鱗癌的微創治療方法，但因5-ALA局部吸收的有限性，及激發波長穿透組織較淺等原因，導致臨床套用效果不佳。因而我們擬對5-ALA-PDT進行改進，利用脂質體的類脂結構輔助5-ALA更好地透皮吸收進入鱗癌組織和細胞，利用納米金光照後產生的強烈的光熱效應的協同作用，提高對腫瘤的殺傷效果。本課題擬製備5-ALA-納米金脂質體複合體，通過離體和在體動物實驗測定透皮吸收效率；在細胞水平檢測5-ALA-納米金脂質體對鱗癌細胞的殺傷效果；建立動物模型，觀察其作用於體內後的安全性和抑瘤效果；通過流式細胞儀、免疫組化染色、RT-PCR、Western blot等方法，對該療法的作用機制以及作用靶點進行初步研究，為開展皮膚鱗癌的靶向、高效、非損傷性局部治療方法提供理論支持和實驗依據。

結題摘要

皮膚腫瘤和皮膚光老化是皮膚科常見的疾病，常見的皮膚惡性腫瘤主要包括鱗狀細胞癌和黑色素瘤。紫外線是導致皮膚光老化的主要外界因素，也是皮膚腫瘤的重要誘發因素。如何防治光老化和惡性腫瘤成為大家關注的重點。皮膚鱗狀細胞癌目前的主要治療方法是手術切除，但有部分腫瘤患者因年齡及皮損部位限制，無法進行手術治療。5-氨基酮戊酸（ALA）光動力學療法是以光、光敏劑和氧的相互作用為基礎的疾病治療手段，通過靶向誘導腫瘤及異常組織細胞損傷或死亡，近年來已套用於臨床。另有研究報導5-ALA可以改善光老化，但是，5-ALA的親水性限制了其在組織與細胞膜間的通透性。納米金具有良好的生物相容性，可與光敏劑結合，通過其光熱效應選擇性殺傷腫瘤細胞。因此，我們通過在體實驗研究5-ALA-納米金結合體透皮吸收效果，體外培養人表皮鱗癌A431細胞株，建立鱗癌動物模型，將5-ALA-納米金結合體局部外用於皮損，予以雷射照射進行光熱治療，檢測治療前後相關基因及蛋白產物的表達水平的變化，分別從細胞和動物水平驗證該種結合體的抗腫瘤效應。同時，我們建立了光老化動物模型，利用該模型探索性研究5-ALA-納米金結合體對於光老化的改善效果。我們通過小鼠在體透皮吸收實驗證明了納米金顆粒的可透皮吸收性並能促進5-ALA被細胞吸收，這為納米金顆粒及5-ALA-納米金結合體發揮光動力作用治療皮膚腫瘤性或非腫瘤性疾病奠定了實驗依據。ALA-納米金結合體可選擇性抑制A431細胞生長，推測該過程是通過調控MAPK通路中p38蛋白磷酸化而發揮效應的，p-p38的高表達可能是促進人表皮腫瘤細胞凋亡，參與5-ALA-納米金結合體誘導小鼠鱗癌組織凋亡過程的重要環節。且皮膚鱗癌組織細胞中p-p38mapk與caspase-3表達升高的一致性表明二者存在一定的關係，此過程可能通過影響MAPK信號通路的蛋白激酶活性及其功能以及細胞凋亡信號通路中的caspase-3基因的異常表達而引起腫瘤細胞凋亡。此外，我們探索性地將納米金用於光老化治療與預防方面，發現納米金的光熱作用可能通過下調MMP-3的表達從而改善光老化，並且對小鼠皮膚的光老化有一定的防護作用，其機制可能與減少ROS產生，從而減少下游MMP-13表達有關，該實驗結果為光老化的防治提供了新方法。