基本介紹
- 書名：21世紀高等院校教材:基因工程原理
- 作者：徐晉麟 陳淳
- 出版日期：2007年8月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：9787030192172
- 外文名：Principles of Genetic Engineering
- 出版社：科學出版社
- 頁數：251頁
- 開本：16
- 品牌：科學出版社
內容簡介,圖書目錄,
內容簡介
《:基因工程原理》適合高等院校生物科學、生物技術專業和農林、醫藥院校相關專業學生作為教科書使用，也可供相關科學研究人員參考。
圖書目錄
前言
第一章基因工程的分子生物學基礎
第一節遺傳信息流的中心法則（centraldogma）：DNA→RNA→蛋白質
一、DNA合成
二、RNA合成
三、蛋白質合成
第二節核酸的生物化學
一、核酸大分子的結構
二、DNA雙螺旋的變性與復性
第三節基因工程中採用的主要酶類
一、序列特異的DNA限制性內切核酸酶
二、連線酶和激酶
三、DNA聚合酶和RNA聚合酶
第四節研究DNA和RNA的方法
一、核酸的分離純化
二、凝膠電泳
三、DNA測序
第五節膜印跡和核酸雜交
第六節實例1：鑑別特定基因轉錄物的轉錄起始點
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第二章原核生物分子克隆的宿主和載體系統
第一節套用廣泛的細菌宿主
一、E.coliK—12的生物學
二、乳糖操縱子
三、細菌限制與修飾系統
四、大腸桿菌的克隆載體
第二節質粒載體
一、質粒生物學
二、質粒上常編碼抗生素一抗性基因
三、質粒DNA克隆載體
四、通過轉化將DNA轉移到大腸桿菌中
第三節噬菌體克隆載體
一、λ噬菌體的生物學
二、λ噬菌體克隆載體
三、M13噬菌體克隆載體
第四節外源DNA和載體的連線
一、外源DNA和載體連線的方法
二、定向克隆
第五節實例2：一個基因在E.coli中的調節表達
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第三章基因文庫的構建
第一節DNA基因文庫
一、基因組文庫
二、DNA文庫的構建
三、用於構建DNA文庫的克隆載體
第二節亞克隆
第三節克隆DNA序列的體外誘變
一、缺失誘變
二、寡核苷酸定向誘變
三、隨機誘變
四、PCR誘變法
五、大引物誘變法
第四節實例3：基因編碼序列的丙氨酸掃描誘變
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第四章基因組DNA的分析
第一節基因組的組成
一、大腸桿菌K—12基因組的組成
二、釀酒酵母基因組的組成
三、人類基因組的組成
第二節基因組作圖
一、用減數分裂的重組頻率進行連鎖作圖
二、用放射誘導染色體重排進行基因組作圖
三、用DNA序列多態性作為遺傳標記進行基因組作圖
四、用遺傳資料、DNA標記和克隆片段來構建連線群圖譜
第三節長的基因組DNA片段的操作
一、用螢光激活細胞分揀法來分揀染色體
二、標籤克隆法
三、染色體的顯微切割
四、脈衝電場凝膠電泳
第四節基因組DNA克隆載體
一、黏粒載體
二、酵母人工染色體（YAC）載體
三、細菌人工染色體（BAC）載體
四、P1噬菌體載體和P1人工染色體
五、哺乳動物人工染色體（MAC）載體
六、用DNA池來篩選基因組文庫
第五節基因調節序列的作圖
一、用體外表達進行基因調節序列作圖
二、定位蛋白質結合位點的分析方法
三、電泳遷移率變動分析
第六節實例4：通過定點克隆分離一個人類致病基因
一、研究目的
二、相關信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第五章cDNA文庫的構建和篩選
第一節將RNA轉變成cDNA
一、mRNA的分離純化
二、cDNA合成
三、cDNA克隆載體
第二節cDNA文庫的篩選
一、簡併寡核苷酸探針
二、抗體探針
三、差示雜交
四、扣除雜交
第三節cDNA表達文庫的功能篩選
一、蛋白質活性分析
二、酵母雙雜交系統
三、cDNA噬菌體展示
第四節用克隆cDNA作為反應物
一、RNA印跡
二、RNase保護實驗
三、核連綴轉錄分析
第五節實例5：體外克隆編碼細胞內信號蛋白的基因
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第六章聚合酶鏈反應
第一節基本的PCR方法
一、PCR擴增循環
二、PCR需要一種熱穩定DNA聚合酶
三、PCR引物的設計
四、兩個引物之間的最佳距離
五、PCR實驗的最最佳化
第二節反轉錄PCR
一、cDNA末端快速擴增（RACE）
二、定量RT—PCR
三、差異表達基因的擴增
四、腸道細菌基因間重複保守序列一聚合酶鏈反應
第三節PCR用於診斷
一、在組織樣本中檢測病原體
二、鑑別遺傳突變
三、用標籤序列位點進行基因型分型
第四節PCR在實驗室中的套用
一、用PCR亞克隆靶DNA
二、PCR介導產生融合基因
第五節解鏈酶複製法
第六節實例6：用RT—PCR克隆細胞特異轉錄物
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第七章培養細胞中克隆基因的表達
第一節基因調控的研究
一、表達載體
二、報導基因
三、反義技術
四、RNA干擾
第二節基因在細胞系中表達的方法
一、基因轉染的策略
二、瞬時轉染
三、穩定轉染
第三節用酵母作為模式真核細胞
第四節蛋白質在培養細胞中的表達
一、E.coli如表達系統
二、桿狀病毒（baculovirus）表達系統
第五節實例7：啟動子選擇轉錄因子的研究
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第八章轉基因動植物
第一節果蠅發育的分子生物學
一、P因子介導的轉化
二、P因子增強子捕獲載體
三、可介導轉化的其他真核轉座因子
第二節構建轉基因的農作物
一、根癌農桿菌介導的基因轉移
二、用基因槍製備轉基因水稻和玉米
第三節轉基因小鼠
一、用受精卵細胞製備轉基因小鼠
二、通過幹細胞的同源重組進行基因敲除
三、人類疾病的轉基因小鼠模型
第四節轉基因家畜
一、用轉基因動物製備藥物
二、動物的體細胞克隆
第五節實例8：敲除轉基因鼠產生特異基因
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第九章基因治療
第一節基因治療的策略
一、體細胞基因治療的策略
二、基因治療的關鍵步驟
三、基因治療的靶細胞的選擇
四、體細胞基因治療的途徑
第二節基因轉移的方法
一、基因轉移的非生物方法
二、基因轉移的病毒方法
第三節基因治療藥物
一、p53抑癌基因
二、siRNA
三、反義RNA
四、核酶
五、肽核酸
六、三鏈DNA
七、自殺基因
第四節基因治療的安全性
第五節實例9：重症聯合免疫缺陷的基因治療
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
習題
主要參考文獻
附錄縮略語表
索引
彩版
第一章基因工程的分子生物學基礎
第一節遺傳信息流的中心法則（centraldogma）：DNA→RNA→蛋白質
一、DNA合成
二、RNA合成
三、蛋白質合成
第二節核酸的生物化學
一、核酸大分子的結構
二、DNA雙螺旋的變性與復性
第三節基因工程中採用的主要酶類
一、序列特異的DNA限制性內切核酸酶
二、連線酶和激酶
三、DNA聚合酶和RNA聚合酶
第四節研究DNA和RNA的方法
一、核酸的分離純化
二、凝膠電泳
三、DNA測序
第五節膜印跡和核酸雜交
第六節實例1：鑑別特定基因轉錄物的轉錄起始點
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第二章原核生物分子克隆的宿主和載體系統
第一節套用廣泛的細菌宿主
一、E.coliK—12的生物學
二、乳糖操縱子
三、細菌限制與修飾系統
四、大腸桿菌的克隆載體
第二節質粒載體
一、質粒生物學
二、質粒上常編碼抗生素一抗性基因
三、質粒DNA克隆載體
四、通過轉化將DNA轉移到大腸桿菌中
第三節噬菌體克隆載體
一、λ噬菌體的生物學
二、λ噬菌體克隆載體
三、M13噬菌體克隆載體
第四節外源DNA和載體的連線
一、外源DNA和載體連線的方法
二、定向克隆
第五節實例2：一個基因在E.coli中的調節表達
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第三章基因文庫的構建
第一節DNA基因文庫
一、基因組文庫
二、DNA文庫的構建
三、用於構建DNA文庫的克隆載體
第二節亞克隆
第三節克隆DNA序列的體外誘變
一、缺失誘變
二、寡核苷酸定向誘變
三、隨機誘變
四、PCR誘變法
五、大引物誘變法
第四節實例3：基因編碼序列的丙氨酸掃描誘變
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第四章基因組DNA的分析
第一節基因組的組成
一、大腸桿菌K—12基因組的組成
二、釀酒酵母基因組的組成
三、人類基因組的組成
第二節基因組作圖
一、用減數分裂的重組頻率進行連鎖作圖
二、用放射誘導染色體重排進行基因組作圖
三、用DNA序列多態性作為遺傳標記進行基因組作圖
四、用遺傳資料、DNA標記和克隆片段來構建連線群圖譜
第三節長的基因組DNA片段的操作
一、用螢光激活細胞分揀法來分揀染色體
二、標籤克隆法
三、染色體的顯微切割
四、脈衝電場凝膠電泳
第四節基因組DNA克隆載體
一、黏粒載體
二、酵母人工染色體（YAC）載體
三、細菌人工染色體（BAC）載體
四、P1噬菌體載體和P1人工染色體
五、哺乳動物人工染色體（MAC）載體
六、用DNA池來篩選基因組文庫
第五節基因調節序列的作圖
一、用體外表達進行基因調節序列作圖
二、定位蛋白質結合位點的分析方法
三、電泳遷移率變動分析
第六節實例4：通過定點克隆分離一個人類致病基因
一、研究目的
二、相關信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第五章cDNA文庫的構建和篩選
第一節將RNA轉變成cDNA
一、mRNA的分離純化
二、cDNA合成
三、cDNA克隆載體
第二節cDNA文庫的篩選
一、簡併寡核苷酸探針
二、抗體探針
三、差示雜交
四、扣除雜交
第三節cDNA表達文庫的功能篩選
一、蛋白質活性分析
二、酵母雙雜交系統
三、cDNA噬菌體展示
第四節用克隆cDNA作為反應物
一、RNA印跡
二、RNase保護實驗
三、核連綴轉錄分析
第五節實例5：體外克隆編碼細胞內信號蛋白的基因
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第六章聚合酶鏈反應
第一節基本的PCR方法
一、PCR擴增循環
二、PCR需要一種熱穩定DNA聚合酶
三、PCR引物的設計
四、兩個引物之間的最佳距離
五、PCR實驗的最最佳化
第二節反轉錄PCR
一、cDNA末端快速擴增（RACE）
二、定量RT—PCR
三、差異表達基因的擴增
四、腸道細菌基因間重複保守序列一聚合酶鏈反應
第三節PCR用於診斷
一、在組織樣本中檢測病原體
二、鑑別遺傳突變
三、用標籤序列位點進行基因型分型
第四節PCR在實驗室中的套用
一、用PCR亞克隆靶DNA
二、PCR介導產生融合基因
第五節解鏈酶複製法
第六節實例6：用RT—PCR克隆細胞特異轉錄物
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第七章培養細胞中克隆基因的表達
第一節基因調控的研究
一、表達載體
二、報導基因
三、反義技術
四、RNA干擾
第二節基因在細胞系中表達的方法
一、基因轉染的策略
二、瞬時轉染
三、穩定轉染
第三節用酵母作為模式真核細胞
第四節蛋白質在培養細胞中的表達
一、E.coli如表達系統
二、桿狀病毒（baculovirus）表達系統
第五節實例7：啟動子選擇轉錄因子的研究
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第八章轉基因動植物
第一節果蠅發育的分子生物學
一、P因子介導的轉化
二、P因子增強子捕獲載體
三、可介導轉化的其他真核轉座因子
第二節構建轉基因的農作物
一、根癌農桿菌介導的基因轉移
二、用基因槍製備轉基因水稻和玉米
第三節轉基因小鼠
一、用受精卵細胞製備轉基因小鼠
二、通過幹細胞的同源重組進行基因敲除
三、人類疾病的轉基因小鼠模型
第四節轉基因家畜
一、用轉基因動物製備藥物
二、動物的體細胞克隆
第五節實例8：敲除轉基因鼠產生特異基因
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題
第九章基因治療
第一節基因治療的策略
一、體細胞基因治療的策略
二、基因治療的關鍵步驟
三、基因治療的靶細胞的選擇
四、體細胞基因治療的途徑
第二節基因轉移的方法
一、基因轉移的非生物方法
二、基因轉移的病毒方法
第三節基因治療藥物
一、p53抑癌基因
二、siRNA
三、反義RNA
四、核酶
五、肽核酸
六、三鏈DNA
七、自殺基因
第四節基因治療的安全性
第五節實例9：重症聯合免疫缺陷的基因治療
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
習題
主要參考文獻
附錄縮略語表
索引
彩版
