《15(S)-HETE對血管內皮功能的影響及作用機制》是依託鄭州大學，由王小芳擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：15(S)-HETE對血管內皮功能的影響及作用機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王小芳
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
動脈粥樣硬化的啟動因素為血管內皮功能受損。內皮細胞緊密連線蛋白（TJ）和粘附連結蛋白（AJ）的正常結構和功能是維持內皮功能的基礎。在損傷內皮的諸多因素中，花生四烯酸的代謝產物近年來受到廣泛關注。我們在前期研究中觀察到花生四烯酸-脂氧化酶-15羥基二十碳四烯酸(15-HETE)對人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)損傷作用最大，但其相關機制目前尚不清楚。本課題擬①觀察15(S)-HETE對體外培養單層 HUVECs通透性的影響；②觀察15(S)-HETE對TJ蛋白和AJ蛋白表達水平、磷酸化水平和各組分間結合/解離狀態的影響，以及對TJ、AJ蛋白和細胞骨架蛋白形態結構的改變，探討其相關的損傷機制。通過本研究，可望闡明15(S)-HETE在動脈粥樣硬化中的作用和機制，有助於更好的了解動脈粥樣硬化的發生過程，並最終為開發針對性治療藥物開闢道路。
結題摘要
本課題歷時3年，研究工作基本按計畫完成。本研究通過細胞實驗及構建動物模型等工作觀察了花生四烯酸代謝產物15(S)-HETE對血管內皮功能的影響，研究其在動脈粥樣硬化發生過程中的作用。研究觀察了15(S)-HETE 對體外培養單層人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelialcells, HUVECs)通透性的影響，分析了對內皮細胞組分緊密結合蛋白（TJ）和粘附蛋白（AJ） 表達水平、磷酸化水平和各組分間結合/解離狀態的影響；並構建高脂飲食模型，觀察12/15脂氧化酶基因敲除（12/15-LOKO）小鼠和高脂飲食小鼠主動脈內AJ蛋白表達水平和磷酸化水平及及各組分間結合/解離。研究發現：15(S)-HETE 可明顯增加內皮細胞通透性，它可使組分蛋白ZO-2和VE-Cadherin的磷酸化表達增加，β-Catenin和P120-Catenin的磷酸化表達減少，同時促進TJ蛋白組分Claudin-1和Claudin-5從ZO-2蛋白上解離，AJ蛋白組分β-Catenin和VE-Cadherin的解離；動物研究結果顯示12/15-LOKO可減少高脂飲食小鼠主動脈內斑塊的形成；同時高脂小鼠中，VE-caderin的磷酸化明顯增加，而12/15-LO基因敲除高脂飲食小鼠VE-Caderin的磷酸化明顯減少。而β-Catenin則呈相反趨勢，高脂小鼠中磷酸化表達減少，12/15-LO基因敲除高脂飲食小鼠β-Catenin的磷酸化明顯增加。這些結果提示：15(S)-HETE通過磷酸化修飾TJ和AJ蛋白來調節內皮屏障的通透性，TJ和AJ結構完整性破壞是15(S)-HETE增加內皮屏障通透性的機制之一。通過本研究，我們部分探索了15(S)-HETE 在動脈粥樣硬化中的作用和機制，有助於更好的了解動脈粥樣硬化的發生過程，並最終為開發針對性治療藥物開闢道路。項目資助發表中文期刊論文1篇，還有2篇論文在發表中。 本研究持續進行中培養研究生4名，其中2名已畢業，2名還在學習中。項目投入經費23萬元，已支出17.9717萬元，各項支出與項目計畫相符。剩餘經費5.0283萬元，剩餘經費將用於本項目研究後續支出。
