黑質SIRT2與帕金森病發病的相關性及其機制研究

《黑質SIRT2與帕金森病發病的相關性及其機制研究》是依託上海交通大學，由汪錫金擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：黑質SIRT2與帕金森病發病的相關性及其機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：汪錫金
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

SIRT2和老年化的關係以及SIRT2抑制劑AGK2能夠通過改變α-Synuclein蛋白的聚集狀態而顯著減輕α-Synuclein 誘導的多巴胺能神經元變性使得SIRT2成為帕金森病發病機制研究的新方向。申請者的預實驗提示黑質SIRT2隨老化而表達上調，也觀察到魚藤酮處理的中腦培養體系SIRT2 表達增高，且AGK2顯著減輕魚藤酮誘導的多巴胺能神經元變性。基於上述，申請者於本項目提出黑質SIRT2和帕金森病發病可能相關，並擬首先從基因和蛋白質水平，以SIRT2為中心，探討老年化、黑質SIRT2和α-Synuclein的關係，並結合環境因素，通過多種手段，研究黑質SIRT2與帕金森病發病的相關性和機制，也將探討氧化應激和蛋白酶體途徑在其中的作用。本研究不僅有助於闡明腦的衰老規律，也必將為帕金森病等老年神經退行性疾病以及眾多蛋白質構象病的發病機制和治療的研究提供有價值的線索。

結題摘要

帕金森病（Parkinson’s disease，PD）是中老年人常見的中樞神經系統退變性疾病。目前，從分子水平去探索疾病的本質，正成為PD研究的發展趨勢。PD的發病與衰老密切相關，在衰老相關分子中，沉默信息調控子2（SIRT2）的地位尤其突出。本項目利用SD 大鼠（包括孕鼠），按照年齡分成不同組別，通過實時定量PCR 技術從mRNA水平檢測各組黑質部位SIRT2 和α-Synuclein 的表達，利用免疫組織化學方法和Western blot 方法等從蛋白質水平檢測各組黑質部位SIRT2 和α- Synuclein 的表達，免疫細胞化學法檢測酪氨酸羥化酶陽性神經元的數目，液閃測定法測定DA攝取力，並檢測TNF-α、IL-1β、NO和超氧陰離子等促炎因子的變化，利用魚藤酮（或鐵劑、MPTP）處理年輕大鼠（或小鼠）和老年大鼠（或小鼠），分別於不同時期觀察大鼠（小鼠）的行為學變化，高效液相色譜電化學法檢測紋狀體的神經遞質，免疫組織化學法檢測黑質多巴胺能神經元，免疫印跡法檢測SIRT2表達，檢測氧化應激和抗氧化相關指標，並利用特異的抑制劑評價SIRT2在老化和帕金森病發病中的作用及其機制，觀察到Mino的前和後處理顯著減輕LPS誘導的DA攝取力下降和TH陽性神經元丟失，Mino的前和後處理顯著減少LPS誘導的TNF-α、IL-1β、NO和超氧陰離子的生成，觀察到魚藤酮（鐵劑、MPTP）處理大鼠（小鼠）引起年齡相關的行為異常和紋狀體DA含量的變化，且引起年齡相關的黑質SIRT2表達的改變以及年齡相關的MDA增高和GSH降低，老年大鼠（小鼠）紋狀體5-HT含量於魚藤酮（鐵劑、MPTP）處理後並未出現變化，老年鼠小腦SIRT2表達以及MDA和GSH含量也並未變化，SIRT2抑制劑劑量依賴地改善魚藤酮（鐵劑、MPTP）誘導的動物行為異常和紋狀體DA含量的降低，進一步的研究顯示SIRT2抑制劑顯著抑制魚藤酮（鐵劑、MPTP）誘導的MDA增高和GSH降低，離體實驗也支持SIRT2在帕金森病發病中的作用以及SIRT2抑制劑通過調整氧化還原於PD中發揮神經保護作用。本項目有助於闡明腦的衰老規律，為帕金森病的發病機制研究和治療藥物的研發提供新的有價值的線索，也必將推動眾多老年神經退行性疾病的研究，有望尋找出它們發病機制和治療藥物開發的共性，具有極大的學術價值和套用價值。