麥胚提取物系統

麥胚提取物系統：通過碾磨麥胚，用篩子或吹風機初選，分出麥胚，然後再將粗製的麥胚加10 倍體積的緩衝液與砂子共研磨。以23 000g 轉速離心，所得的上清液稱為S23。上清液通過層析將抑制翻譯的內源胺基酸和植物色素等分離出去。提取物用微球菌核酸酶處理以破壞內源mRNA,最大限度降低翻譯背景。將S23 分裝，保存於-20C冰櫃中。使用前應進行透析。提取物中添加磷酸肌酸和磷酸肌酸激酶的能量生成系統和增加鏈延伸效率的亞精胺，以及一定量的乙酸鎂。麥胚提取物系統可穩定地表達一些在兔網織紅細胞系統中翻譯受到抑制的DNA，比如那些含有低濃度的雙鏈mRNA 的模板。利用麥胚系統進行蛋白質翻譯合成進行研究時，需加的物質與網織紅細胞系統所需加的相同。但由於該體系無mRNA，所以必須加人mRNA。

該系統的優點是適於研究mRNA,活力強，價格低廉等。但該體系的缺點是不同製品的活性差別較大麥子品種尤為重要的因素)，而且在合成分子質量較大(7.1x 10^) 的蛋白質時往往提前終止，而在合成分子質量較小(如50000 左右) 的蛋白質時沒有這個缺點。麥胚提取物系統缺乏許多在兔網織紅細胞中翻譯需要的轉錄因子，因此對於表達真核轉錄因子是一個很好的選擇系統。