濕熱消毒法是一種最有效的滅菌方法。在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽壓下，溫度達到121.3℃,維持15～20min，可殺死包括芽孢在內的所有微生物。
高壓蒸汽滅菌器就是根據這一原理製成，常用語一般培養基、生理鹽水、手術敷料等耐高溫，耐濕物品的滅菌。
高壓滅菌法也受到一些因素的制約，如脂肪和油類不能用水混合，因此不能用高壓蒸汽滅菌。塑膠製品高溫下會熔化，許多化學藥品高溫下會受到破壞等等。此外，高壓滅菌所需要的時間取決於被滅菌物品的種類和體積。必須保證熱蒸汽有充分的時間穿透進入物品，因此物品的體積越大，所需的時間也就越長；物品越不易被蒸汽透入，所需的時間也越長。
高壓蒸汽滅菌法的注意事項
第一，無菌包不宜過大（小於50cm×30cm×30cm），不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹中央。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利於蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品乾燥。消毒滅菌完畢，關閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態。
第二，布類物品應放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進入包裹中央，嚴重影響滅菌效果。
第三，定期檢查滅菌效果。經高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1周為
