體細胞檢測一般指科研和生產裝置（包括T型瓶，生物反應器，微載體）中各類細胞（哺乳動物細胞，酵母細胞，牛耐體細胞等）的計數。體細胞數量是衡量奶牛生理健康狀況的重要指標，高體細胞數直接指證奶牛的乳腺患有炎症性疾病。體細胞檢測技術主要用來檢測，乳製品中的體細胞數量。
基本介紹
- 中文名：體細胞檢測技術
- 工具：體細胞檢測儀
國內外現有的體細胞檢測技術,主要套用,
國內外現有的體細胞檢測技術
原理：
PI染色的特異性和穩定性極高，是對細胞核進行染色，而不是整個細胞，細胞技術採用DNA結合PI.計量結果準確。根據螢光顯微鏡法和特殊的放置樣本並連線內置試劑的盒子的使用。
1、體細胞計數的標準方法
體細胞計數的標準方法主要採用顯微鏡鏡檢，常用的是將牛奶染色、乾燥後在顯微鏡下計數。具體的方法如下：染色液配方：次甲基蘭：1克，90%的乙醇54ml，四氯乙烷：40ml，冰醋酸：60ml。染色步驟：用微量注射器和標準模板將10 ul的樣品均勻塗布在1cm2的面積內，在室溫下平放，乾燥，浸入染色液中3分鐘，取出，再次乾燥，然後用水衝去多餘的染色液，再後乾燥。用一放大倍數為300~500倍或更大的顯微鏡進行計數，計數後折算成體細胞數。
2、螢光顯微鏡計數法
與標準方法相比，此法採用螢光染色劑。其染色劑配方為吖啶橙0．1%，緩衝液為2%的甲醛和四硼酸鈉0.02moI/L，使用前染色液和緩衝液按1：5比例混合。每天隨配隨用。
3、CMT試驗
cMT法的測定原理是基於細胞在遇到表面活性劑時，會收縮的現象，體細胞越多，凝集狀態越強，出現的凝集片越多。一般是通過化學試劑NaoH、烷基芳香酸以及溴甲酚紫，使牛奶中的體細胞釋放脫氧核糖核酸(DNA)而產生凝集，再根據凝集的現象來判讀體細胞數的相對量。
4、庫爾特計數儀測定法
庫爾特計數器內設有二個電極，當牛奶中的粒子通過電極狹縫時，由於電阻增加而改變了原來液體的高電導性，阻力增加，電壓上升，產生了一個相當子粒子大小的電脈衝。而脈衝的數量則表示了通過狹縫的粒子數量。由於原光已經設定了脈衝的臨界水平，所以只有高出該水平的脈衝被自動記錄下來，這樣儀器就可直接讀出每毫升樣品的體細胞數。
5、高速體細胞計數儀
主要有丹麥福斯公司的Fossomatic5000系列牛奶體細胞測定儀、荷蘭DELTA體細胞計數儀和美國Benuy計數儀。測定原理是基於一些含有螢光原予團的染料能提供具有螢光性能的分子，染料分子被較短波長的可見光或紫外光激發時產生髮射光，因此可儀器接收。其工作原理為將被測定的細胞染色並置於懸浮液體之中，然後強迫細胞逐一通過一個非常窄小的縫隙管道。同時，向其發出特殊光束，使得每一個被染色後的細胞在通過測定點時也了出回應光束脈衝信號，採用電子技術，再將其脈衝信號處理，從而達到對體細胞自動計數。
主要套用
牛乳中的體細胞數(Somatic Cell Count,SCC)，是指每毫升奶中的細胞總數。體細胞中多數是白細胞(即巨噬細胞、嗜中性白細胞和淋巴細胞)，約占牛體細胞數的98%～99%，其他1%～2%的體細胞是乳腺組織脫落的上皮細胞。生乳是指從健康奶畜擠下，僅經過冷卻、過濾，但未經過任何殺菌處理的常乳。牛乳質量的控制主要是通過監測理化指標和衛生指標來保證的，前者限定了牛乳中各種營養成分的含量，如脂肪、蛋白質、乳糖等，後者對牛乳中可能存在的微生物含量作出了要求，包括SCC和菌落總數(Total Bacteria Count，TBC)。
體細胞中含有不受歡迎的脂肪酶及血纖維蛋白酶。脂肪酶分解脂肪，產生酸敗氣味，阻止優酪乳乳酸菌繁殖；血纖維蛋白酶減少乳酪的產量，並且即使在冷藏的條件下，這些酶仍然會發揮作用，因此，體細胞數過高，易導致奶製品保質期縮短。另～方面，由於體細胞體積較大，易於藏匿病菌等其他雜菌，因此，體細胞數過高，會嚴重影響產品殺菌效果。隨著體細胞的增多，牛奶的pH值會升高，乳白蛋白會減少，這會導致乳酪產量的減少。20世紀中期以來幾乎所有的乳業已開發國家都把牛奶體細胞數作為牛奶收購標準之一，在一些歐盟國家規定加工消毒奶的原料奶體細胞數不能超過30萬。體細胞過高，乳的成分也會發生變化，脂肪、乳糖和總酪蛋白會減少，而乳清蛋白及鈉的含量會明顯升高。
