《靶向GAS2-Calpain軸抑制CML幹細胞的研究》是依託蘇州大學，由周海俠擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：靶向GAS2-Calpain軸抑制CML幹細胞的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：周海俠
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
生長抑制特異蛋白GAS2（Growth arrest specific 2）是鈣蛋白酶Calpain的內源性抑制劑。我們發現GAS2是慢性粒細胞白血病（CML）CD34+細胞的新調控因子；靶向GAS2（RNAi或表達GAS2Δ171-313）可通過活化Calpain抑制CML細胞生長、增強其伊馬替尼（IM）敏感性。由於不存在已知的GAS2抑制劑，如何轉化這項研究進展以抑制CML幹細胞和靜息期CD34+細胞仍是嚴峻挑戰。在前期研究基礎上，本項目將研究GAS2與Calpain結合的分子機制、確定GAS2與Calpain結合的關鍵性肽段（GAS2模擬肽），研究GAS2模擬肽對CML幹細胞長期培養起始細胞（LTC-IC）能力、數量和小鼠移植能力的影響，探討GAS2模擬肽單獨或聯合IM抑制靜息期CD34+細胞的能力。本項目將為通過靶向GAS2-Calpain軸改善CML的治療提供理論依據和實驗基礎。
結題摘要
人類慢性髓細胞白血病（CML）是源自造血幹細胞的惡性血液病，靶向疾病特異的融合蛋白BCR-ABL的伊馬替尼（Imatinib mesylate，IM）已極大改善了疾病的治療。然而，藥物耐受、疾病復發仍困擾部分患者，因而有必要更為深入地研究CML細胞的生長與生存機制。前期研究顯示生長抑制特異蛋白2（Growth-arrest specific 2, GAS2）在人類慢性髓細胞白血病中高表達，通過表達其顯性負性突變體（GAS2DN）能相對特異地抑制CML細胞的生長。為轉化利用這一科學發現成果，我們假設GAS2DN的生長抑制功能集中在部分肽段。本項研究中，首先通過生化手段證實GAS2DN的生長抑制功能位於其C-端部分。合成GAS2蛋白N-端不具有生長抑制的部分肽段進行修飾，最佳化其轉染K562和CML患者CD34+細胞的條件。在GAS2DN的C-端區域合成3個肽段，以N-端肽段為對照進行比較，發現肽段-B具有最強的生長抑制功能。它不僅能增強K562細胞的化療藥物敏感性，也能相對特異地抑制CML患者細胞的體外生長。最後，數據也顯示肽段-B能抑制處於靜息期的CML患者CD34+細胞的體外生長。這些結果顯示本項目的基本科學假設正確，GAS2DN中的部分肽段也具有生長抑制功能，肽段-B能作為繼續深入研究GAS2-Calpain2在CML細胞生長中的作用的新研究工具，有望為針對GAS2-Calpain2相互作用而設計小化合物提供重要基礎，提供靶向GAS2-Calpain2軸而改善CML治療的新策略。
