《電磁脈衝調控中性粒細胞遷移的作用及分子機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由郭國禎擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：電磁脈衝調控中性粒細胞遷移的作用及分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：郭國禎
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
電磁脈衝（Electromagnetic Pulse, EMP）對免疫系統和免疫細胞的生物學效應和機制仍未闡明。我們前期研究發現，EMP輻照可顯著抑制小鼠中性粒細胞從骨髓向外周血的遷移及其對趨化因子的定向趨化能力。本項目擬藉助transwell小室和小鼠腹腔炎趨化模型進行體外和體內趨化實驗，明確EMP對小鼠外周血和骨髓中性粒細胞遷移能力的調控作用；進而從信號轉導和細胞極化兩方面研究其分子機制：利用流式細胞儀、磷酸化特異性抗體和GST pull down實驗檢測EMP對小鼠中性粒細胞趨化因子受體表達以及PI3K/AKT、ERK和Rho GTPase活化的影響；藉助免疫螢光染色和雷射共聚焦顯微鏡，探討EMP對小鼠中性粒細胞極化狀態的調控作用。本研究將為深入理解EMP對中性粒細胞功能的影響提供實驗依據，為研究EMP對其他免疫細胞的效應提供新思路，為制定EMP防護標準提供理論基礎。
結題摘要
我們前期研究發現電磁脈衝輻照可顯著抑制小鼠中性粒細胞從骨髓向外周血的遷移及其對趨化因子的定向趨化能力。本課題旨在探討電磁脈衝調控中性粒細胞遷移的作用及分子機制研究。取得的研究結果有：1.EMP輻照可迅速抑制小鼠中性粒細胞對歸巢趨化因子IL-8和炎症趨化因子Fmlp的定向趨化和遷移能力，抑制效應隨時間延長逐漸增強並於輻照後48小時達到最大。2. 不同場強的EMP均可顯著抑制小鼠中性粒細胞對fMLP和IL-8的定向趨化能力，其中以場強為50kV/m時效應最強；EMP對小鼠中性粒細胞定向趨化能力的抑制效應隨著場強的增大先增強而後減弱，符合生物體對外界刺激的反應規律。3. 採用小鼠腹膜炎模型進行了體內趨化試驗研究，再次證實EMP可以顯著抑制中性粒細胞對趨化因子fMLP和IL-8的定向趨化和遷移能力。4. EMP輻照對中性粒細胞的吞噬能力、氧爆發能力、粘附能力均沒有影響。5. 流式細胞儀檢測結果表明，單純用fMLP和IL-8處理細胞並不能改變細胞的相應受體水平，但EMP輻照顯著增加了fMLP和IL-8R在細胞膜表面的表達。6. EMP輻照並不能影響細胞內的F-actin水平7. 趨化因子受體後的各種激酶分子和信號轉導分子在EMP輻照後均表現出活化增強的現象。這些趨化因子受體相關信號分子包括有PI3K、AKT、PAK1、Rac1等。這些結果為理解EMP調控中性粒細胞趨化的作用提供了有益的線索。
