《雞蛋中卵運鐵蛋白過敏原的IgG和IgE結合表位的精細定位》是依託南昌大學，由高金燕擔任項目負責人的地區科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：雞蛋中卵運鐵蛋白過敏原的IgG和IgE結合表位的精細定位
- 項目類別：地區科學基金項目
- 項目負責人：高金燕
- 依託單位：南昌大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本項目擬以雞蛋中主要過敏原卵運鐵蛋白為研究對象，分離純化卵運鐵蛋白，製備出SDS-PAGE純的抗卵運鐵蛋白兔血清，然後採用噬菌體肽庫技術，以純化的兔血清為靶分子對噬菌體七肽庫或十二肽庫進行篩選，在篩選結果的基礎上，擬通過肽掃描技術對雞蛋中卵運鐵蛋白的兔血清IgG結合表位進行精確的表位定位。另外，用雞蛋過敏患者的血清或構建的血清池開展卵運鐵蛋白的人血清IgG和IgE結合表位的篩選與表位精細定位工作。.通過對雞蛋中卵運鐵蛋白過敏原表位定位的研究，可以探明卵運鐵蛋白導致雞蛋過敏反應的物質基礎（過敏原表位的胺基酸組成與序列），將對深入開展雞蛋過敏研究具有重要意義，並可為進一步開展低過敏性或無過敏性的蛋製品加工以及過敏原的檢測等研究工作提供理論依據。
結題摘要
雞蛋過敏是嬰幼兒和兒童多發的食物過敏反應，至少約0.5%–2.5%的嬰幼兒和兒童對雞蛋過敏。卵運鐵蛋白在蛋清蛋白中含量占第二，是公認的六大雞蛋過敏原之一，其導致過敏的機理目前尚不清楚，主要原因之一是缺乏對其表位的認識。因此，本項目針對雞蛋卵運鐵蛋白的IgG和IgE結合表位開展了精細定位工作。首先建立了一步離子層析法製備高純度卵運鐵蛋白的方法，純度高達97%，並獲得了一個基於電泳分析方法用於鑑別有鐵卵運鐵蛋白的發明專利。用製備的卵運鐵蛋白免疫實驗兔，製備了高效特異的抗卵運鐵蛋白的兔多克隆抗體，並建立了親和純化抗卵運鐵蛋白特異性IgG的方法，純化後的IgG效價為1:20萬。然後採用噬菌體肽庫技術，以純化的兔血清為靶分子對噬菌體七肽庫進行篩選，篩選到了17個卵運鐵蛋白主要線性模擬表位區。在篩選結果的基礎上，利用商業化的固相合成肽試劑盒合成雞蛋卵運鐵蛋白的多肽陣列，通過肽掃描技術對雞蛋中卵運鐵蛋白的兔血清IgG結合表位和人血清IgG/IgE結合表位進行精確的表位定位，共定位出23個卵運鐵蛋白兔血清IgG結合表位和13個卵運鐵蛋白人血清IgG結合的表位，卵運鐵蛋白人IgG和兔IgG共有的結合表位有7個。通過本項目的研究，初步探明了卵運鐵蛋白導致雞蛋過敏反應的物質基礎（過敏原線性表位的胺基酸組成與序列），對深入開展雞蛋過敏研究具有重要意義，並可為進一步開展低過敏性或無過敏性的蛋製品加工以及過敏原的檢測等研究工作提供表位結構信息。
