雙指示劑甲醛滴定法是利用胺基酸具有酸、鹼兩重性質來滴定的方法。
基本介紹
雙指示劑甲醛滴定法
(一)原理：胺基酸具有酸、鹼兩重性質，因為胺基酸含有-COOH基顯示酸性，又含有-NH2基顯示鹼性。由於這二個基的相互作用，使胺基酸成為中性的內鹽。當加入甲醛溶液時，-NH2與甲醛結合，其鹼性消失，破壞內鹽的存在，就可用鹼來滴定-COOH基，以間接方法測定胺基酸的量。
（二）試劑
(2)0.1%百里酚酞95%乙醇溶液。
(3)0.1%中性紅50%乙醇溶液。
(4)0.100N氫氧化鈉標準溶液。
(三)操作步驟：
移取一定量(約含20毫克左右的胺基酸)樣品溶液2份,分別置於250毫升錐形瓶中,加水50毫升;其中一份加3滴中性紅指示劑，用0.100NNaOH溶液滴定至琥珀色為終點。另一份加入中性甲醛10毫升及3滴百里酚酞指示劑，搖勻，靜置1分鐘，(此時藍色應消失)。再用0.100NNaOH溶液滴定至淡藍色。記錄兩次滴定所消耗的鹼液毫升數，用下述公式計算
計算：
胺基酸態氮(%)=（(V1-V2)×N×0.014）×100/W
式中：
N：NaOH標準溶液當量濃渡。
V1：測定樣品消耗NaOH標準溶液的體積(ml)。
V2:測定空白消耗NaOH標準溶液的體積(ml)。
W：樣品溶液相當樣品的質量(克)。
0.014：氮的毫克當量。
注意事項：
測定時樣品的顏色較深，應加活性炭脫色之後再滴定。
