隨機引物法:隨機引物是人工合成的長度為6個寡核苷酸殘基的寡聚核苷酸片段的混合物。對於任何一個用作探針的DNA片段,隨機引物混合物中都會有一些六核苷酸片段可以與...
將禽流感病毒H9N2亞型毒株核蛋白(NP)基因3′端較為保守的、約350bp的編碼序列通過限制性內切酶Hae¸切割、分離後,用隨機引物法製備Digoxigenin2112dUTP標記探針...
完全隨機引物法 對模板DNA質和量要求低,操作簡單,易改進,50 ng起始模板可產生0.2-0.5μg產物,最低起始模板量可達5 pg。 產量低,保真性差 LOH研究,SNP分...
隨機引物法合成的產物也是 RNA-DNA 的雜交體。把 cDNA 克隆到載體中之前,必須把這種雜交體中的 RNA 轉變成 DNA 鏈,即形成雙鏈 DNA 分子。2). 雙鏈 cDNA ...
另外一種方法為酶促標記法,是在酶促反應條件下,將預先標記的核苷酸分子摻入核酸探針分子中去。一般常規使用的標記方法為缺口平移法和隨機引物法,對於人工寡聚核苷酸...
2.隨機引物法變性的探針溶液加入6個核苷酸的隨機DNA小片段,作為引物,當後者與單鏈DNA多個部位互補結合後,按鹼基互補原則不斷在其3'-OH端添加同位素標記的單核苷酸...
基因組DNA的標記可採用缺口平移法、隨機引物法(random priming)和DOP-PCR等技術,通常採用生物素-14-dATP標記腫瘤DNA,地高辛-11-dUTP標記正常DNA,亦可用直接螢光素...
前兩者較為常用,通常採用切口平移法(Nick translation)或隨機引物法(Random Primer)對探針標記。在已知探針DNA結構及序列情況下也可採用PCR或RNA逆轉錄法標探針。...
③DNA探針的標記方法較成熟,有多種方法可供選擇,如缺口平移,隨機引物法,PCR標記法等,能用於同位素和非同位素標記. DNA探針可以用來診斷寄生蟲病,現場調查及蟲種...
方案1 隨機引物法:用隨機寡核苷酸延伸法標記純化的DNA片段 792 方案2 隨機引物法:在融化瓊脂糖存在下用隨機寡核苷酸延伸法標記DNA 798 方案3 用切口平移法標記DNA...
人工合成的短寡核苷酸可以用T4多聚核苷酸激酶進行末端標記。探針標記的方法有隨機引物法、切口平移法和末端標記法。六、預雜交(prehybridizafion)將固定於膜上的DNA...
方案9 1隨機引物法:利用隨機寡核苷酸延伸法對純化DNA片段進行放射性標記303方案9 2隨機引物法:在熔化瓊脂糖存在下利用隨機寡核苷酸延伸法進行DNA的放射性標記305...
第一節 探針標記法第二節 隨機引物法第三節 末端標記法第四節 探針純化第十四章 PCR產物克隆第一節 PCR產物重組策略第二節 PCR產物的純化...
雙鏈DNA5'突出(5'overhang)末端的補平(fill-in);雙鏈DNA3'突出(3'overhang)的打平(也稱削平);5'突出末端的標記;隨機引物法進行DNA標記;Sanger雙脫氧法進行...