《長鏈非編碼RNA H19在肝纖維化中的作用及其分子機制研究》是依託復旦大學，由張駿擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：長鏈非編碼RNA H19在肝纖維化中的作用及其分子機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張駿
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肝星狀細胞（HSC）異常活化是肝纖維化的中心環節和抗纖維化治療研究的關鍵靶標。長鏈非編碼RNA（lncRNA）是繼miRNA後生物醫學領域又一熱點，迄今尚無lncRNA與肝纖維化的研究報導。H19是較早發現的lncRNA之一，與多種疾病發生相關。申請人近期研究發現，H19的表達可被與慢性肝病密切相關的URG11上調；過表達H19顯著促進肝星狀細胞LX2的增殖，抑制H19則顯著抑制其活化；進一步研究發現，抑制H19可下調TGF-β/Smad信號通路關鍵蛋白Smad2、Smad3活性。故推測H19可通過激活TGF-β/Smad通路，活化HSC，進而促進肝纖維化的進展。因此，本研究擬進一步明確H19的促纖維化作用，闡明其相關信號通路，確定H19靶蛋白和調控機制，並在體內觀察以H19為靶點的抗纖維化效應。預期成果將為明確肝纖維化發生髮展機制提供線索，並為抗纖維化藥物研發提供新的方向。
結題摘要
肝纖維化是由急/慢性肝損傷導致的一種可逆性病理改變，表現為細胞外基質在肝組織間質的過度沉積，長期積累將發展為不可逆的肝硬化甚至肝癌，是慢性肝病發展惡化的必經階段。肝纖維化的控制及逆轉在肝病的治療和預後中起著十分重要的作用。我們在前期發現長鏈非編碼RNA H19與肝纖維化相關的基礎上，在人肝星狀細胞LX2中進一步明確了H19對肝纖維化標誌——星狀細胞活化的促進作用，過表達H19可上調α-SMA、Collagen-I以及TGF-β信號通路關鍵分子SMAD2和SMAD3的磷酸化水平。分子機制層面，發現H19可結合抑制microRNA-148a（miR-148a），從而間接升高miR-148a下游靶標USP4的表達水平，而已知去泛素化酶USP4可降低TGF-β受體泛素化，促進SMAD2的磷酸化。反之，過表達H19的同時轉染microRNA-148a的類似物，可以降低H19的促纖維化作用，從而確定了H19 - miR-148a - USP4這一促纖維化調控軸。最後，通過包被H19的慢病毒尾靜脈注射入肝纖維化造模小鼠體內，發現小鼠肝臟H19的表達上升可進一步提高肝纖維化水平，從而在體內驗證了H19的促纖維化效應。本項目在體內外明確了H19的促纖維化作用並闡明了其具體分子機制。H19有望成為新的靶標，為逆轉肝纖維化治療提供新的方向。
