吡啶硫酮鋅（zinc pyrithione，簡稱ZPT），是2-吡啶硫醇-1-氧（2-pyridinethiol-1-oxide）的鋅絡合物，作為去頭屑劑廣泛用於洗髮、護髮化妝品中。我國化妝品衛生標準GB7916-87規定ZPT僅用於用後能清洗掉的產品中，其含量不得超過0.5%。因此建立快速特異性的ZPT測定方法十分必要。
基本介紹
- 中文名：銅鹽絡合法
- 外文名：The copper salt complex legal
- 採用：柱前衍生法
- 適用於：測定化妝品中的吡啶硫酮鋅
簡介,試劑和儀器,分析步驟,計算,方法的準確度和精密度,
簡介
本法採用柱前衍生法，預先將ZPT與銅鹽作用，生成銅絡合物。此絡合物比較穩定，可用HPLC分離測定，得到ZPT含量。
套用範圍
本法適用於測定洗髮、護髮類化妝品中的吡啶硫酮鋅。
原理
本法採用柱前衍生的HPLC。吡啶硫酮鋅與Cu2+作用生成吡啶硫酮銅絡合物（Cu2+ complex of pyrithione），再經HPLC分離（1），紫外檢測器檢測。根據標準品的保留時間定性，峰面積定量。
試劑和儀器
1吡啶硫酮鋅標準溶液：精確稱取0.1000g吡啶硫酮鋅標準品，用水飽和的氯仿定容至100ml。此液含ZPT 1.0mg/m1。
2 吡啶硫醇-1-氧（2－pyridinethiol –l-oxide簡稱PT）：分析純。
3 五水硫酸銅（copper （II）sulphate pentahydrate〕：分析純。
4 檸檬酸：優級純。
5 磷酸氫二鈉：優級純。
6 乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）：優級純。
7 氯仿：分析純。
8 甲醇：優級純。
9 緩衝液（pH5.0）：0.1mo1/L檸檬酸與0.2mo1/L磷酸氫二鈉混合（97+103）。
儀器
1高效液相色譜儀。
2超聲浴器。
3離心機。
分析步驟
1 樣品預處理
精確稱取含10mg ZPT的樣品於100ml容量瓶中，用氯仿飽和的緩衝液（pH5.0）稀釋至刻度(2)。充分振盪幾分鐘後，置於超聲浴器上超聲幾分鐘(3)，取此溶液10.0ml加入10.0ml水飽和氯仿、2.0ml lmo1/L硫酸銅溶液，充分振盪5min後，1500r/min離心5min。取下層溶液為HPLC待測試液備用。
2 色譜條件
色譜柱： Nucleosil 5C18（150mm×4.6mm ID，5μm）。
檢測器：紫外檢測器，檢測波長320nm。
流動相3：2的甲醇-水(1)。
流動相流速：1.0m1/min。
柱溫：25℃。
積分儀： 7000B型（System Instruments，Tokyo，Japan）。
3標準曲線
分別取ZPT標準溶液（3.1）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml於離心管中，用水飽和的氯仿稀釋至10.0ml，得濃度分別為0、0.02、0.04、0.06、0，08、0.10mg/m1的標準系。各管分別加入10.0ml氯仿飽和的緩衝液（pH 5.0），2.0m1 1mo1/L硫酸銅溶液(4)。混合物按樣品處理方法振盪、離心、分離。取5μl下層溶液用HPLC進行分析(5)。記錄其保留時間、峰面積。濃度與峰面積作圖可得標準曲線。
4測定
取（1）製備的樣液5μl，注入高效液相色譜儀。根據標準品的保留時間（3）定性。記錄其峰面積,並從標準曲線上查出對應的ZPT濃度。
計算
按下式計算ZPT含量（%）：
c =A×100/（m×1000）×100%
式中：c――樣品中ZPT的含量，%；
m――樣品質量，g；
A――從標準曲線上查出的ZPT濃度，mg/ml。
方法的準確度和精密度
樣品加標回收實驗，5次測定結果，回收率在98.0～100.6%,相對標準偏差為0.8～2.0%。在0.1～0.5μgZPT範圍內線性良好。
註解：
（1）為消除金屬離子的干擾，在進行色譜分析前，色譜系統可用0.1%EDTA以0.5ml/min流速預沖洗,其後用水沖洗乾淨。
（2）用氯仿飽和的緩衝液（pH5.0）稀釋樣品，若導致固態物質析出，可改用氯仿飽和的水稀釋樣品。
（3）ZPT不溶於洗髮液或其它化妝品中，但能在這些化妝品中均勻分散；ZPT不溶解於水，而溶於1mol/L的HCl或NH3-NH4Cl緩衝液（pH11.0）。在1mol/L的HCl中ZPT不穩定。溶解後立即降解10%；24小時後，降解25%；室溫下置於避光器中保存4天，降解93%。ZPT能穩定存在於NH3-NH4Cl（pH11.0）中，然而，在此溶液中加入硫酸銅溶液，產生深藍色鹽絡合物。由於此鹽絡合物的存在，降低了有機相對ZPT的銅絡合物的萃取效率。因此本法採用pH=5.0的緩衝溶液或水稀釋樣品，超聲處理水樣品液，均勻性良好，5次測定標準偏差為1.4%。
