《鈣磷蛋白在肺癌骨轉移中的功能及作用機制研究》是依託上海交通大學，由趙暉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：鈣磷蛋白在肺癌骨轉移中的功能及作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：趙暉
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
鈣結合蛋白介導的Ca2+信號通過調控骨組織的吸收和重塑，在腫瘤骨轉移過程中發揮著至關重要的作用。本項目擬以肺癌骨轉移的臨床樣本為研究對象，利用二維凝膠電泳和質譜技術篩選鑑定出鈣結合蛋白家族的新成員鈣磷蛋白CAPS1作為肺癌骨轉移新的分子標誌物，並進一步研究CAPS1在肺癌骨轉移過程中的功能，利用體外細胞遷移實驗、侵襲實驗和肺癌骨轉移小鼠模型分析CAPS1對肺癌細胞體外侵襲能力和體內轉移能力的影響，闡明CAPS1影響肺癌細胞骨轉移的分子機制。通過對CAPS1在肺癌骨轉移過程中的功能及作用機制的深入研究，將增強人們對於肺癌骨轉移發生機制的認識，以期確立CAPS1作為肺癌骨轉移的治療新靶點，為臨床肺癌骨轉移的診斷和治療提供新的思路。
結題摘要
為進一步加強對於非小細胞肺癌骨轉移發生機制的認識，並希望確立CAPS1作為肺癌骨轉移（或惡性腫瘤骨轉移）新的靶點，為骨轉移癌臨床診斷和治療提供新的轉移、非小細胞肺癌骨侵犯、原發性骨惡性腫瘤（骨肉瘤）及正常骨組織臨床骨組織樣本，提取各組織的蛋白，利用二維凝膠電泳對蛋白進思路。 我們收集了非小細胞肺癌骨行分離，並利用質譜分析技術鑑定非小細胞肺癌骨轉移組與非轉移組間的差異蛋白質位點，結果顯示鈣磷蛋白CAPS1在非小細胞肺癌骨轉移組織中表達存在明顯差異。我們通過慢病毒質粒轉染建立了高表達CAPS1非小細胞肺癌細胞株，並觀察其在增殖、周期、侵襲和遷移等生物學行為改變；運用CAMP激活劑Forskolin及Sotrastaurin干預觀察A549和高表達CAPS1-A549細胞的影響；建立了肺癌多發轉移的動物模型，觀察高表達CAPS1的A549細胞在侵襲及轉移方面的改變。通過上述實驗，我們發現CAPS1在NSCLC骨轉移組織標本中表達明顯增加；低轉移潛能的非小細胞肺癌細胞株A549中CAPS1的表達明顯低於其他細胞株；通過慢病毒轉染的高表達CAPS1-A549細胞在增殖及遷移和侵襲能力方面明顯高於對照組，並且可能與CAMP及RAF/MEK相關。 我們同時監測了肺癌骨轉移患者在接受唑來膦酸治療後血清鈣離子和25(OH)D3水平變化，分析骨鈣代謝及維生素D與肺癌骨轉移患者臨床預後的相關性；血清25(OH)D3和血鈣對預測SREs發生具有較好的靈敏度和特異度，高血鈣和低血清25(OH)D3是影響肺癌骨轉移患者發生SREs的重要危險因素，血清25(OH)D3對評估肺癌骨轉移患者的預後有一定價值。同時對NSCLC骨轉移患者的骨轉移組織CAPS和RPLP2的表達分析發現低表達者生存時間較長。 綜上所述，我們在臨床數據和基礎實驗（體內、體外）分析CAPS對於肺癌細胞體外侵襲能力和體內轉移能力的影響，闡明CAPS影響肺癌細胞骨轉移的分子機制。
