《金針菇低溫誘導子實體發育的信號傳導和調控機制研究》是依託華南農業大學，由郭麗瓊擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：金針菇低溫誘導子實體發育的信號傳導和調控機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：郭麗瓊
- 依託單位：華南農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
金針菇是我國最大宗的工廠化栽培菇類。目前金針菇產業存在的兩大問題是：①子實體產量低且不穩定、品質差；②金針菇子實體分化需要低溫刺激誘導，工廠化栽培能源消耗巨大。原因是人們對金針菇子實體分化發育的機理還不了解。本項目擬以白色金針菇Fv1菌株及其誘變育成的高溫節能型菌株F1C4為材料，採用RNA-Seq技術對這兩個菌株在常溫及低溫誘導條件下的轉錄組學進行比較分析研究，採用TALEN靶向基因敲除技術和RNAi技術鑑定基因功能和轉錄因子、信號受體的功能，探明低溫誘導金針菇子實體分化發育的關鍵功能基因、信號傳導途徑以及調控因子，揭示金針菇低溫誘導子實體分化發育的機制。這對定向改造金針菇基因組培育高溫節能型新品種、有效調控金針菇生長發育過程、提高金針菇子實體產量和品質、減少金針菇工廠化栽培的能源消耗將具有重大的科學理論意義和實際套用價值。
結題摘要
本課題對冷誘導金針菇子實體形成機理開展了研究，獲得的主要結果：1.對金針菇黑暗條件下獲得的菌絲和黑暗及低溫條件下獲得的原基進行de novo轉錄組測序，組裝獲得20157個unigenes，其中15058個unigenes得到功能注釋，並且菌絲和原基間共有7935個差異表達基因，4025個上調，3910個下調；2.對差異表達基因進行KEGG pathway分析和GO功能注釋，雙組份系統轉導途徑、MAPK通路、 GATA轉錄因子、MADS轉錄因子、熱激蛋白、非飽和脂肪酸途徑、鈣傳導通路等可能在冷誘導金針菇子實體形成中發揮重要作用；3.構建CRISPR-Cas9載體對7個擬冷誘導金針菇子實體形成基因進行突變，PEG法轉化金針菇單核菌株YX74及篩選後，獲得33個含hcas9的轉化子菌株；4.構建CRISPR-Cas9載體對3個擬冷誘導金針菇子實體形成基因進行突變，ATMT轉化金針菇單核菌株YX74及篩選後，獲得73個含FvCas9的轉化子菌株，最後在mRNA和蛋白質水平對FvCas9進行檢測。
