重組作圖

原理及方法在中斷雜交中,根據基因轉移的先後次序,以時間為單位求出各基因間的距離,叫做時間作圖法。如果基因間轉移的時間在兩分鐘以內,用這種方法求得的基因間距離就不很精確可靠,重組作圖是根據基因間重組率進行定位的。接合重組作圖的特點:(與減數分裂生物的區別)(1)不用親本類型 (i)無法區分。(ii)不重組將丟失。(2)兩對基因間的交換頻率,必須在形成部分二倍體的條件下,計算重組率。(3)部分二倍體如果不發生重組,無法鑑別。只有最後一個基因進入受體細胞,長並發生重組才能鑑別。即最後一個基因發生重組的條件下,計算兩基因的重組率。(4)接合重組不產生相反的重組類型。例如根據中斷雜交試驗知 lac 和 ade 基因是緊密連鎖的而且 lac 比 ade 先進入受體。試驗 :Hfr lac+ade+strs× F-lae-ade-strr混合60分,鏈黴素基本培養基。未雜交的被殺死。選出來的都是ade+stfr。因為ade+是在lac+之後進入F-,所以,lac自然進入,形成了部分二倍體。在ade後部發生了交換,但另一交換位置需進一步鑑別。
將重組子菌落影印培養在EMB(曙紅+美藍)培養基上,如果是紫紅色,說明重組子含有lac+ade+,另一交換髮生在lac前端,如果粉紅色,說明交換髮生在lac+ade間。lac-ade為lac-ade+重組子: lac+ade不會產生
用時間單位法lac-ade的圖距是一分鐘,所以時間單位和重組值的關係大致是1分鐘 = 20%和重組值。

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