酸性磷酸酶試驗是指精斑檢驗的預備試驗方法之一。用以測定檢材有無含精斑的可能。人精液中含大量酸性磷酸酶,含量遠高於其它體液和分泌液,若檢材中測出較高活性的此酶,則提示可能為精斑。常用的試驗方法是瓦拉克氏法,即在PHs、溫度37°C條件F,磷酸鈣β-荼酯受酸性磷酸酶的作用而分解產生β一荼酚,遇重氮鹽或重氮色素後呈橙紅色反應。
試驗靈敏度高,尤其是不受是否含精子的影響,更適合於陳舊及無精子精斑的檢驗。但對肝、肺、腎、心及陰道分泌物等檢材也可呈陽性反應,故只能作為篩選性試驗。陽性結果只說明可能是精斑,需進一步做確證試驗。