酶促重組等溫擴增技術

其反應體系類似於RPA， 它通過模擬生物體遺傳物質自身擴增複製的原理，將來源於細菌，病毒和噬菌體的特定重組酶、外切酶、聚合酶等多酶體系進行改造突變並篩選其功能，通過不同的核酸擴增反應體系進行最佳化組合，從而獲得核心的重組等溫擴增體系，建立特殊擴增反應體系，在37-42℃恆溫條件下，可將微量DNA/RNA的特異性區段在數分鐘內擴增數十億倍，即（Enzymatic Recombinase Amplification）ERA技術方法。

國家專利和國際專利的申請號：201910262085.3；PCT201910262085.3。

定義

酶促重組等溫擴增技術（ERA技術）是一種等溫核酸擴增技術，它是利用抗體製藥領域先進的Molecular Design、Directed Evolution、Affinity Maturation 等技術手段，將來源於細菌，病毒和噬菌體的特定工具酶進行改造突變並篩選其功能，通過不同的核酸擴增反應體系進行最佳化組合，從而獲得核心的重組等溫擴增體系，即（Enzymatic Recombinase Amplification）ERA技術方法

性質

ERA技術在核酸檢測領域開發了三大核心技術，體溫擴增技術，能在恆溫條件下，將痕量的核酸模板擴增到可以檢出的水平；單分子螢光檢測技術(SM@RT)，集恆溫擴增與螢光信號檢測於一體，可實現擴增過程的實時檢測；核酸快速釋放技術，為實驗節省更多的時間

套用

1、研究診斷領域：

針對細胞培養中的支原體污染，提供一種快速、簡單、靈敏的檢測方法，只需要20分鐘便能得出結果

2、公共衛生領域：

針對危害公眾健康的呼吸道傳染性病原，腸道致病病原及生殖系統病原進行快速檢測

3、食品安全領域：

針對致病微生物、動物源性成分和轉基因農產品進行快速現場檢測

4、農業生產領域：

針對水產、畜牧養殖和寵物中各類病原，進行早期快速檢測和診斷

ERA反應原理

1、重組酶首先與上下游引物結合，尋找同源雙鏈DNA，一旦定位發生鏈交換

2、同時SSB蛋白與親本鏈綁定，阻止其與其脫離的模板鏈發生相互作用

3、DNA聚合酶從上下游引物的3”端啟動合成，形成兩條雙鏈DNA，如此循環重複擴增