《遺傳性中頻耳聾新致病基因SLC44A4的認定及致聾機制研究》是依託同濟大學，由馬兆鑫擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：遺傳性中頻耳聾新致病基因SLC44A4的認定及致聾機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：馬兆鑫
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
遺傳性非綜合徵型中頻耳聾致病基因報導較少。本課題組收集了一個4代37人的非綜合徵型常染色體顯性遺傳性中頻耳聾家系，在排除了常見的耳聾基因後，對其中3例患者與1例正常人進行深度測序，經生物信息學分析及Sanger法測序驗證，初步確定SLC44A4基因（NM_025257）Met156Val A＞G點突變與疾病共分離；下調斑馬魚的slc44a4基因，聽覺相關表型發生明顯改變，提示該基因極有可能是一個新的耳聾致病基因。在此基礎上，本項目擬開展以下研究：1.在更多的感音神經性耳聾患者中檢測SLC44A4基因，明確其突變率；2.套用模式生物斑馬魚，觀察slc44a4下調及CRISP/Cas9定點突變後，聽覺器官形態功能變化；3.在293T和SH-SY5Y兩種細胞中，檢測SLC44A4突變及表達下調後細胞膽鹼攝入與乙醯膽鹼合成的變化，闡明SLC44A4突變導致耳聾的分子機制。
結題摘要
本課題組就一個相對罕見的4代37人的非綜合徵型常染色體顯性遺傳性中頻耳聾家系展開研究，初步確定SLC44A4基因（NM_025257）Met156Val A＞G點突變與疾病共分離；下調斑馬魚的slc44a4基因，聽覺相關表型發生明顯改變，提示該基因極有可能是一個新的耳聾致病基因。在此基礎上，本項目在1000耳聾散發病例中檢測到SLC44A4一個新的Gly171Arg G511C致病位點變異，進一步證明其突變可引發耳聾；套用模式生物斑馬魚，觀察到slc44a4下調顯著影響聽覺器官形態功能，套用人源SLC44A4 mRNA可有效挽回嗎啡啉整體下調slc44a4後斑馬魚聽覺表型異常，證實該基因與聽覺功能密切相關；建立Slc44a4內耳及神經系統條件性敲除的小鼠模型進一步研究了SLC44A4與聽覺功能的關係及突變致聾機制；構建穩定表達野生和突變型的神經母細胞瘤細胞SH-SY5Y，發現與野生型比較表達突變型SLC44A4的細胞膽鹼攝入與乙醯膽鹼合成水平明顯低下，在細胞水平初步探明 SLC44A4 突變使支配外毛細胞的內側橄欖耳蝸束傳出系統重要神經遞質Ach 合成分泌下降，致使外毛細胞功能異常及死亡，最終導致聽力下降的致病機制。
