《選擇性分離和富集代謝標記的糖蛋白》是依託湖南師範大學，由曾盈擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：選擇性分離和富集代謝標記的糖蛋白
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：曾盈
- 依託單位：湖南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
糖蛋白上糖鏈的分支結構以及表達的密度對細胞-細胞間的信號傳遞，細胞的複製等細胞功能有著舉足輕重的作用。糖蛋白微觀結構的改變與多種疾病和癌症的發展和轉移有著明顯的關係，對岩藻糖基化蛋白和唾液酸化糖蛋白的研究對癌症的早期檢測和診斷，癌症的介入治療都有明顯的參考意義。在不對細胞的遺傳物質進行操作的情況下，利用表達在細胞表面有化學報告基團的非天然糖，通過特殊的化學反應對其進行修飾。本項目將在前期研究的基礎上，以岩藻糖和唾液酸為結構基礎，以代謝寡糖工程技術為手段，對活體細胞表面的岩藻糖基化蛋白和唾液酸化糖蛋白進行研究。綜合運用磁性納米粒子，對其進行分離和富集，再使用LC-MS，MS， NMR等技術對其進行分析，分析活體細胞該糖蛋白的微觀結構及其變化。本項目將為岩藻糖蛋白的生理作用和臨床套用提供科學依據。
結題摘要
生命體內蛋白質上的糖鏈結構的微觀不均一性，極低的含量，使檢測和跟蹤糖蛋白成為糖科學研究中待解決的重要基礎性問題之一。磁性納米粒子作為一種新型的納米材料，具備納米粒子的化學和物理性能，並且有著獨特的磁學性質，能在外加磁場下迅速分離，且磁性納米粒子表面能進行各種修飾，不僅豐富了磁性納米材料的種類，也能為生物分析領域提供新的材料。本課題的工作研製了含不同可裂解的功能基團的磁性納米粒子，包括含可斷裂的氨氧基，可斷裂的疊氮基和含吡啶二硫功能基的磁性納米粒子，並進行了形貌分析。本課題利用含氨氧基磁性納米粒子對Jurkat細胞表面上的含唾液酸的糖蛋白進行分離和富集，並利用LC-MS/MS進行了組學分析，在組學分析里中，根據得到的48687種肽段，並根據肽段推測得到2371種已知蛋白，且其中無岩藻糖基化的N-連結糖肽47種。目前已接受文章一篇，已申請專利1項,一篇文章已投遞。另外兩篇文章和兩項專利正在準備中。項目目前取得的經驗為以後製備磁性納米粒子對進行廣譜、定量和都對比糖蛋白組學研究打下了基礎。
