《基於唾液酸氧化特性的比較糖蛋白組學新方法研究》是依託華中科技大學，由劉欣擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：基於唾液酸氧化特性的比較糖蛋白組學新方法研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉欣
- 依託單位：華中科技大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
臨床研究表明許多疾病的發生與發展過程與糖蛋白是否糖基化和糖基化位點上糖鏈結構變化緊密相關，如何準確地測定蛋白質糖基化位點及其糖鏈結構對糖蛋白研究有著極為重要意義。但是由於糖蛋白上相連糖鏈結構的複雜性和多樣性，給糖蛋白分析造成很大的困難，因此發展對不同結構糖肽選擇性分離及富集的高效方法成為糖蛋白組學的重要研究方向之一。本課題擬建立一種快速、簡便的利用唾液酸與其它單糖氧化反應的差異性，選擇性氧化唾液酸或非唾液酸化糖肽，並採用水溶性高分子材料為分離介質，選擇富集帶有不同糖鏈結構糖肽的比較糖蛋白組學方法。在研究中，分離富集後的糖肽經過肽-N-糖苷酶處理後，採用液相色譜-質譜聯用的方法對標準糖蛋白的糖基化位點及唾液酸化程度進行測定。並將該方法套用於正常人血清和肝癌病人血清中的比較糖蛋白組學研究，挖掘特定糖蛋白在疾病狀態下變化的規律，尋找可能的疾病標誌物。
結題摘要
摘要： 臨床研究表明許多疾病的發生與發展過程與糖蛋白的是否糖基化和糖基化位點上糖鏈結構變化緊密相關，如何準確的測定蛋白質糖基化位點及其糖鏈結構的對糖蛋白研究有著極為重要的意義。但是由於糖蛋白上相連糖基複雜性和多樣性，極大制約了分析的可能性和靈敏度，因此發展對不同結構糖基化多肽選擇性分離及富集的高效方法成為糖蛋白組學的重要研究方向之一。我們通過利用不同濃度的高碘酸鈉與反應溫度，選擇性氧化含有唾液酸或非唾液酸糖肽，生成帶有醛基的多肽，然後採用含有氨基的水溶性高分析材料與之發生還原氨化反應進行富集，分離富集後的糖肽經過肽-N-糖苷酶處理後，採用液相色譜-質譜聯用的方法對糖蛋白的糖基化位點及唾液酸化程度進行測定。在研究中，我們也建立一種簡單和高效的唾液酸的衍生方法用於含唾液酸的糖鏈分析，所建立的方法可以完全衍生不同糖苷鍵結合的唾液酸，並且不破壞唾液酸的O-乙醯化修飾。對人、小鼠及大鼠血清中的N-糖鏈分析結果表明，所建立的方法可以用於血清中N-糖鏈結構變化研究。
