《轉錄因子TCF25調控心肌肥大的分子機制研究》是依託湖南師範大學，由李永青擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：轉錄因子TCF25調控心肌肥大的分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李永青
- 依託單位：湖南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
申請人等用細胞和小鼠心肌肥大模型及人心肌肥大患者樣本的初步分析結果表明，TCF25可能是心肌肥大發生的抑制因子。目前尚無TCF25心臟功能的報導。同時，申請人證明TCF25與心肌肥大抑制因子FHL2（促進β-Cantenin的乙醯化）相互作用；其也可能通過招募與TCF4結合的HDAC發揮轉錄抑制作用。申請人據此假設TCF25可能是FHL2與HDAC兩者間的共同調節因子（參與FHL2的促乙醯化作用以及HDAC的去乙醯化作用），通過經典Wnt信號調控心肌肥大的發生。本項目擬以原代大鼠心肌細胞、TCF25轉基因和基因敲除小鼠為模型，通過RT-PCR、qRT-PCR、免疫印記、Pull-down、Co-IP、報告基因分析、組織學和細胞免疫螢光分析、ChIP等多種方法，結合基因過表達和基因沉默策略，研究和證實該假說，闡明TCF25通過經典Wnt信號抑制心肌肥大的分子機制。
結題摘要
TCF25是本科實驗室首次發現的一種轉錄抑制因子。該基因在胚胎和成體心臟中的高表達，提示其可能在心臟發育和成體心臟功能中有重要的作用。為了探究這種轉錄抑制因子在成體心臟中的功能，本課題培育了TCF25轉基因和基因敲除小鼠，通過RT-PCR、qRT-PCR、免疫印跡、Pull-down、Co-IP、亞細胞定位、報告基因分析、EMSA、ChIP、組織學分析等多種方法進行了研究。結果顯示：（1）該基因在心肌肥大患者的心肌組織以及受病理性肥大因子刺激的大鼠原代心肌細胞、小鼠心臟中的表達水平均顯著降低；（2）TCF25在體內調控心肌的病理性肥大反應；（3）TCF25與β-Cantenin、LEF1形成三體複合物，並可直接結合在靶基因啟動子上抑制經典Wnt信號通路的轉錄激活因子β-Cantenin和LEF1的活性，從而發揮抑制心肌肥大的效應； （4）TCF25可特異性地與HDACs的一個成員結合，抑制輔助轉錄因子MEF2與其靶基因啟動子的結合，從而起抑制心肌肥大的作用；（5）TCF25還可與心肌肥大調節因子FHL2發生相互作用，但我們的研究結果未證實這種相互作用能協同抑制心肌肥大。本項目的研究成果揭示了TCF25在心肌肥大中的作用並豐富了對心肌肥大分子機制的理解。本項目已發表標註此項目的論文15篇（其中SCI論文10篇）；培養畢業碩士研究生7名，參加國內學術交流10人次。
