《轉基因幹細胞來源的肝細胞抗HCV感染研究》是依託浙江大學，由孫仁擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：轉基因幹細胞來源的肝細胞抗HCV感染研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：孫仁
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
晚期肝細胞性肝癌（HCC）缺乏有效治療手段。C型肝炎病毒（HCV）感染是HCC重要危險因素之一；受肝者體內HCV往往導致HCC患者肝移植失敗。人類胚胎幹細胞（hESCs）、誘導多功能幹細胞（iPSCs）的研究進展使得從基因及細胞水平治療HCC成為可能。我們推測向患者輸入可以抵抗HCV感染的幹細胞使失代償的肝細胞再生，將根本消除HCV所致HCC復發可能。我們前期研究發現，靶向作用於HCV保守序列的短髮卡RNA（shRNA）或下調細胞表面受體CD81可以抑制HCV的複製；對病毒具有高親和性纖連蛋白結合體（內抗體）可以抑制病毒感染。本項目研究中，我們將在hES或iPS內導入具有抗HCV複製能力的shRNA或內抗體，體外誘導這些細胞分化為肝細胞，並在FRG鼠中重建肝臟。通過體內、體外研究這些肝細胞的抗HCV能力，評價其抑制HCV所致肝細胞惡性轉化的潛能。研究結果將為HCV相關HCC治療提供新線索。
結題摘要
HCV是慢性、終末期肝病，包括慢性肝炎、肝硬化以及肝細胞性肝癌（HCC）的主要治病因素。受肝者體內HCV持續存在可導致HCC 患者肝移植失敗。通過本項目研究，我們 構建了CD81 shRNA穩定敲除hES肝癌細胞株；建立了hES細胞分化為肝細胞實驗方法；並評價了肝癌細胞中評估CD81缺失（通過導入shRNA）對HCV感染、複製的影響。研究結果支持通過抗HCV幹細胞來源的肝細胞移植作為HCC患者治療的可能性。此外，我們利用全基因組隨機插入失活及第二代測序技術相結合的高通量篩選平台，構建了高分辨病毒遺傳譜（High-resolution genetic profile of viral genomes）， 將15寡核苷酸庫被隨機插入HCV的基因組，並篩選出4個在抗IFN功能中具有關鍵作用的區域。研究結果將為HCV的抗病毒治療提供新線索及新方法。
