《質粒介導的沙門氏菌耐藥基因水平轉移的分子特徵分析》是依託上海交通大學，由周秀娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：質粒介導的沙門氏菌耐藥基因水平轉移的分子特徵分析
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：周秀娟
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
沙門氏菌是引起食物中毒的一種重要的食源性致病菌，食物鏈中抗生素的廣泛使用及濫用，導致食源性沙門氏菌多重耐藥日趨嚴重，耐藥基因水平轉移是重要原因。本項目組前期研究發現，在這些多重耐藥沙門氏菌中普遍存在質粒這種能介導耐藥基因傳播的重要可移動元件。本項目將以50株左右的食源性多重耐藥沙門氏菌（腸炎與鼠傷寒）為材料，通過質粒消除和耐藥基因檢測，來估算質粒對耐藥表型的決定能力；通過對耐藥相關質粒高通量的全序列測定和比較分析，來篩查質粒上與耐藥基因轉移相偶聯的特異元件；通過耐藥菌株與敏感菌株間質粒的接合轉導，來評價質粒攜帶的耐藥基因的轉移風險；通過質粒中耐藥基因與特異元件的突變研究，來闡明耐藥基因的疊加效應；依託沙門氏菌基因組大數據，通過匯總多個耐藥相關質粒中特有元件的變化規律，從而初步揭示質粒介導的沙門氏菌耐藥基因水平轉移的分子特徵，來進一步豐富食源性沙門氏菌耐藥形成的分子機制。
結題摘要
沙門氏菌是引起食物中毒的一種重要的食源性致病菌，食物鏈中抗生素的廣泛使用及濫用，導致食源性沙門氏菌多重耐藥日趨嚴重，耐藥基因水平轉移是重要原因。本項目組前期研究發現，在這些多重耐藥沙門氏菌中普遍存在質粒這種能介導耐藥基因傳播的重要可移動元件。經過3年的努力，本項目以246株耐藥沙門氏菌（前期篩選的110株與本項目新增的136株）為實驗材料，通過對其耐藥質粒類型和耐藥基因的檢測，發現耐藥質粒的攜帶率高達85.4%，腸炎與鼠傷寒沙門氏菌的優勢質粒型分別為IncFIIs和IncHI2，質粒介導的耐藥基因與其對應耐藥表型的符合度大於80.0%；分別挑選22株β-內醯胺類耐藥菌株（bla基因）、13株qepA陽性菌株和36株fosA3陽性菌株進行質粒消除和共接合實驗，證實了這些耐藥基因均位於可移動的耐藥質粒上，接合效率為10-4~10-6，並且攜帶有多個耐藥基因的IncFII質粒的接合子展現出相應抗生素的高水平耐藥；通過對IncHI2型和IncI1型耐藥質粒的序列測定，分別鑑定到新型的IncHI2-IS26-Class1整合子偶聯的耐藥轉移模組和耐藥基因盒截斷並整合到毒力基因cia中的融合轉移區段；針對介導喹諾酮耐藥的5個基因進行了點突變或過量表達，結果顯示基因的突變數量或表達量同MIC值正相關；採用泛基因組學手段，分析了來源於本項目和公共資料庫的近400個沙門氏菌耐藥質粒，發現10種重要的獲得性耐藥基因的占比呈逐年增長趨勢，77.3%的耐藥基因存在1種優勢亞型。綜上，本項目為揭秘質粒介導的沙門氏菌耐藥特徵提供了基礎數據，為解析耐藥基因水平轉移的分子機制提供了科學依據。在項目實施期間，在項目資助下發表論文8篇（SCI論文7篇），其中項目主持人以第一作者發表SCI論文4篇，培養研究生3名。
