《豬流行性腹瀉微量血清中和試驗操作規程(SN/T 1699.1-2006)》為SN/T 1699的第1部分——豬流行性腹瀉微量血清中和試驗操作規程，《豬流行性腹瀉微量血清中和試驗操作規程(SN/T 1699.1-2006)》參照國際動物衛生組織（OIE）的標準《診斷方法和疫苗標準手冊》，2004年第五版，並參考中華人民共和國進出境動物檢疫規程手冊制定。
基本介紹
- 書名：豬流行性腹瀉微量血清中和試驗操作規程
- 作者：中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局
- 出版日期：2006年4月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：155066216753
- 外文名：Protocol of Micro-Serum Neutralization Test for Porcine Epidemic Diarrhea
- 出版社：中國標準出版社
- 頁數：3頁
- 開本：16
- 品牌：北京勁松建達科技圖書有限公司
內容簡介,文摘,編輯推薦,
內容簡介
《豬流行性腹瀉微量血清中和試驗操作規程(SN/T 1699.1-2006)》首次發布的出入境檢驗檢疫行業標準。由中國標準出版社出版，國家認證認可監督管理委員會提出並歸口，中華人民共和國廣東出入境檢驗檢疫局起草。
文摘
著作權頁：
4.4 中和試驗
4.4.1 稀釋液
用Eargles MEM作為血清和病毒的稀釋液，各試驗孔內加入50μL稀釋液。
4.4.2 血清稀釋
將被檢血清從1：4稀釋至1：64，每個稀釋度作3孔，每孔加各稀釋度血清50μL，第一孔作為血清毒性對照，第二、三孔為正式實驗孔。病毒回歸試驗和其他各項對照可用另一塊微量板操作。
4.4.3 加病毒液
將稀釋好每50μL中100TCID50的病毒液按每孔50μL加到血清毒性對照孔之外的各孔內，振盪均勻。血清毒性對照孔加入50μL培養液代替病毒液，置37℃5%二氧化碳培養箱內中和1 h。
4.4.4 加細胞液
將稀釋成20×104/mL～30×104/mL的PK—15細胞懸液，按每孔100μL加入中和完畢的各試驗孔內，置37℃5%二氧化碳培養箱培養48 h～72 h，每天觀察CPE，一般在72 h終判。
4.4.5 對照
對照孔的有關操作可按試驗孔的有關操作進行。
細胞對照：4孔～8孔，每孔含稀釋液100μL，細胞懸液100μL。
陰性血清對照：4孔～8孔，每孔病毒液50μL，細胞懸液100μL。
陽性血清對照：4孔～8孔，每孔病毒液50 μL，細胞懸液100μL。
4.5 病毒回歸試驗
將工作病毒稀釋成0.1個TCID50，、1個TCID50、10個TCID50、100個TCID50四個稀釋度。
每個稀釋度8個孔，按毒價判定方法操作，對照的判讀時間同試驗孔。
結果10個或10個以上TCID50試驗孔應全部出現CPE，1個TCID50應有2個～6個孔出現CPE，0.1個TCID50，應全部不出現CPE。
4.4 中和試驗
4.4.1 稀釋液
用Eargles MEM作為血清和病毒的稀釋液，各試驗孔內加入50μL稀釋液。
4.4.2 血清稀釋
將被檢血清從1：4稀釋至1：64，每個稀釋度作3孔，每孔加各稀釋度血清50μL，第一孔作為血清毒性對照，第二、三孔為正式實驗孔。病毒回歸試驗和其他各項對照可用另一塊微量板操作。
4.4.3 加病毒液
將稀釋好每50μL中100TCID50的病毒液按每孔50μL加到血清毒性對照孔之外的各孔內，振盪均勻。血清毒性對照孔加入50μL培養液代替病毒液，置37℃5%二氧化碳培養箱內中和1 h。
4.4.4 加細胞液
將稀釋成20×104/mL～30×104/mL的PK—15細胞懸液，按每孔100μL加入中和完畢的各試驗孔內，置37℃5%二氧化碳培養箱培養48 h～72 h，每天觀察CPE，一般在72 h終判。
4.4.5 對照
對照孔的有關操作可按試驗孔的有關操作進行。
細胞對照：4孔～8孔，每孔含稀釋液100μL，細胞懸液100μL。
陰性血清對照：4孔～8孔，每孔病毒液50μL，細胞懸液100μL。
陽性血清對照：4孔～8孔，每孔病毒液50 μL，細胞懸液100μL。
4.5 病毒回歸試驗
將工作病毒稀釋成0.1個TCID50，、1個TCID50、10個TCID50、100個TCID50四個稀釋度。
每個稀釋度8個孔，按毒價判定方法操作，對照的判讀時間同試驗孔。
結果10個或10個以上TCID50試驗孔應全部出現CPE，1個TCID50應有2個～6個孔出現CPE，0.1個TCID50，應全部不出現CPE。
編輯推薦
《豬流行性腹瀉微量血清中和試驗操作規程(SN/T 1699.1-2006)》首次發布的出入境檢驗檢疫行業標準。由中國標準出版社出版，國家認證認可監督管理委員會提出並歸口，中華人民共和國廣東出入境檢驗檢疫局起草。
