變性球蛋白小體生成試驗,血液中加入氧化還原染料煌焦油藍,經37℃孵育後,HbH因氧化變性而發生沉澱,呈顆粒狀,被染色深藍色,均勻而彌溫地分散在紅細胞內。
別名,檢查名稱,分類,化驗取材,原理,試劑,操作方法,正常值,結果臨床意義,附註,
別名
Heinz小體生成試驗
檢查名稱
變性球蛋白小體生成試驗
分類
血液生化檢查 > 蛋白質測定
化驗取材
血液
原理
將乙醯苯肼加至被檢血中,37℃溫育後,即可生成紅細胞包含體(變性珠蛋白小體)。
試劑
(1)抗凝劑:肝素、EDTA或草酸鹽。
(2)緩衝液:0.066mol/L KH2PO4 13份加入0.066mol/L Na2HPO4B7份,配成pH7.6溶液,在100ml上述溶液中加入葡萄糖200mg。此溶液置於4℃下保存,如此液呈現雲霧狀,則應丟棄。
(3)乙醯苯肼溶液:在室溫中取乙醯苯肼100mg溶於100ml上述緩衝液。此溶液應於配後1h內使用。
(4)5g/L甲紫鹽水溶液:甲紫0.5g溶於9g/L氯化鈉100ml水中。
操作方法
(1)用去纖維蛋白或肝素、EDTA、草酸鹽抗凝,取被檢血和正常對照血。
(2)取試管(7.5cm×1.2cm)2支,一管加入乙醯苯肼緩衝液2ml,再加入被檢抗凝血0.1ml,另一管加乙醯苯肼緩衝液同量,再加入正常血0.1ml,作為對照。
(3)以滴管將上述二管混合液吸吹數次,置37℃溫育2h,再以滴管吸吹數次,再放於37℃溫育2h。
(4)染色:取上述混合液1滴置載玻片上,加2~3滴甲紫鹽水溶液,混勻。
(5)覆以蓋玻片,5~10min後在顯微鏡下觀察變性珠蛋白小體。
正常值
含有5個以上變性珠蛋白小體的紅細胞,正常人占0%~28%平均值為11.9%。在G-6-PD缺乏者平均可達67.8%有的作者提出32.5%為正常與異常的分界限。
結果臨床意義
與變性球蛋白小體染色試驗相同。
增多:不穩定血紅蛋白病、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)缺乏症、伯氨喹啉型溶血型貧血。
附註
(1)緩衝液和乙醯苯肼濃度,加入血量的多少及保溫時間均對結果有一定影響,故檢查時的標準應力求一致。
(2)用滴管吸吹,是使紅細胞與氧充分接觸,這對變性珠蛋白小體的形成是很重要的步驟。
(3)被檢者的紅細胞比積應先調至與正常相近水平。