表觀遺傳因子TET1在胃癌中的抑癌機制研究

《表觀遺傳因子TET1在胃癌中的抑癌機制研究》是依託上海交通大學，由付華林擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：表觀遺傳因子TET1在胃癌中的抑癌機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：付華林
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

甲基胞嘧啶雙加氧酶TET（tet methylcytosine dioxygenase）催化5mC生成5羥甲基胞嘧啶（5hmC），並進一步氧化為5fC和5caC。TET介導的DNA去甲基化被認為是一種新的表觀遺傳抑癌機制。TET家族分子中的TET1在多種癌症包括胃癌中被認為具有抑癌基因功能,但是其具體抑癌機制需要進一步闡明。我們初步的組織學以及細胞學研究結果顯示TET1下調癌基因EZH2，而TET1高表達誘導p53及p53磷酸化，同時TET1高表達激活DNA-PK，其原因是TET1去甲基化反應與TDG介導的DNA損傷和修復緊密相連。我們擬進一步藉助組化分析和組織晶片、基因轉染、5hmC抗體免疫共沉澱、DNA microarray等技術進行系統研究，期望揭示TET1對EZH2、p53、p53家族其他分子的調控在去甲基化誘導的DNA修復以及胃炎到胃癌發生過程中的可能作用，為胃癌治療尋找新靶點。

結題摘要

胃癌的發生和遺傳因素，表觀遺傳因素，炎症感染，組織微環境的變化息息相關。TET介導的DNA去甲基化被認為是一種新的表觀遺傳抑癌機制,但是其具體抑癌通路需要進一步闡明。我們從組織學上研究了TET1，TET2，TET3，EZH2,5hmc的表達，以及在胃癌細胞系進行了TET1的細胞轉染和隨後的5hmc，Ki67，EZH2表達分析，證明了胃癌組織中TET1及5hmc水平下降而EZH2水平增加，TET1在癌細胞中的過表達可以催化大量5hmc的生成，並同時引起ki67和EZH2的下降，促進p53和p53-Ser15磷酸化的表達，對於p53上游激酶通路的分析發現DNA-PK的磷酸化同時增加，而ATM和ATR沒有發生顯著變化，這些實驗表明TET1高表達情況下DNA-PK的激活可能是誘發p53磷酸化和p53蛋白水平增加的原因。胃癌組織中不僅5hmc水平有下降，某些胃癌樣品中5mc的水平也在下降，由於5hmc是5mc的衍生物，所以5hmc的降低一個原因可能是伴隨著5mc水平下降而下降。我們研究了一個重要炎症標誌中性粒細胞在胃癌發生髮展中的變化情況，我們證明在從胃炎到胃癌發展過程中，中性粒細胞的數量是持續增高的，中性粒數目在胃癌組織中達到正常胃組織中心粒細胞數平均值的24倍，而胃腸化生組織中中性粒細胞數達到正常組織平均值的9倍。在中性粒細胞不斷增加的過程中，伴隨著組織中更高的細胞分裂水平以及中性粒細胞趨化因子IL8轉錄的增加，同時E-cadherin在轉錄水平以及蛋白水平下降。E-cadherin是一個重要的細胞粘附分子也是一個重要的癌症抑制蛋白，這個結果說明癌症細胞中的炎症反應可以通過下調E-cadherin對癌症發生髮展起著促進作用。腫瘤中中性粒細胞的持續性升高，並不受腫瘤病人的性別年齡，腫瘤分期，腫瘤分型以及腫瘤轉移與否等因素的影響。我們的研究發現不僅在胃癌組織中TET1水平比正常組織低，在胃炎組織中TET1水平也有下降的趨勢。我們進一步證實了在胃癌癌前病變胃腸化生組織中TET1表達下降，而胃腸化生組織中5hmc水平非常低，表明5hmc和TET1下降的現象在胃癌發生的早期如胃炎胃腸化生階段就已經發生，持續的慢性炎症可能對胃病變組織中的表觀遺傳學異常有重要影響。