《衣原體III型分泌系統結構的低溫電鏡研究》是依託中山大學，由張勤奮擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：衣原體III型分泌系統結構的低溫電鏡研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張勤奮
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
衣原體可引起人和動物多種疾病。III型分泌系統是革蘭氏陰性致病菌的一種特殊的蛋白分泌裝置， 能直接向宿主細胞分泌毒力蛋白，在致病菌的致病過程中起著至關重要的作用。衣原體III型分泌系統對衣原體入侵宿主細胞、衣原體的生存有關鍵作用。本研究擬採用冷凍電子斷層掃描三維重構技術、ET-average等技術，對不同階段、不同狀態的衣原體的III型分泌系統進行原位三維結構研究，解析分析不同狀態下衣原體的III型分泌系統的變化，研究結果將為衣原體疾病防治策略提供信息。
結題摘要
本研究通過常規電鏡制樣、高壓快速冷凍-冷凍替換、直接投入冷凍等多種制樣技術，對不同狀態的沙眼衣原體、衣原體感染的宿主McCoy細胞進行樣品製備，並通過常規電鏡、冷凍電鏡斷層成像三維重構技術等技術，對沙眼衣原體及其入侵宿主細胞的過程進行了原位三維重構。並結合subtomogram-average技術，對沙眼衣原體三型分泌系統（Type III secretion system, T3SS）進行原位結構解析。研究獲得了游離狀態、入侵宿主細胞狀態以及感染宿主細胞後產生的包涵體內的沙眼衣原體的原位三維結構。結果表明三種狀態下的衣原體均有T3SS，在包涵體內的T3SS與包涵體膜發生作用。並且捕獲了衣原體從靠近宿主細胞到慢慢被宿主細胞膜包裹，直至進入宿主的過程。對T3SS在游離和與宿主細胞膜接觸兩種狀態下的原位三維結構進行了比較，發現與宿主膜接觸後，T3SS各大小、直徑和結構發生了變化，基體的中間管道從實心變成中空狀態，並在宿主膜上形成了一個轉運通道。兩種狀態的T3SS上均有與外膜接觸的特殊結構。衣原體可引起人和動物多種疾病。III型分泌系統是革蘭氏陰性致病菌的一種特殊的蛋白分泌裝置，能直接向宿主細胞分泌毒力蛋白，在致病菌的致病過程中起著至關重要的作用。本研究結果可為衣原體所引起的疾病防控策略提供直觀信息。
