血清脂蛋白電泳是用於高脂蛋白血症分型和了解冠心病的血脂狀態的臨床辦法，可以更好地指導臨床診療工作，使用的檢測試劑有巴比妥-巴比妥鈉緩衝液、染色液等。
基本介紹
- 中文名：血清脂蛋白電泳
- 外文名：Serumlipoproteinelectrophoresis
- 拼音：xuè qīng zhī dàn bái diàn
- 分類：血液生化檢查、脂類測定
簡要概述,基本原理,檢測試劑,操作方法,附註參考,正常值,臨床意義,相關疾病,
簡要概述
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英文名稱：
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基本原理
脂蛋白是在鹼性pH條件下，以瓊脂糖凝膠或醋酸纖維條帶作為載體，從陽性方向來進行分離的。形成的蛋白區帶可以用脂肪染料如蘇丹黑或者油紅染色，它們只用於脂蛋白染色。在瓊脂中可能會有附加的聚陰離子和二價陽離子沉澱。脂蛋白沉澱帶用光密度計可立即定量分析。脂蛋白區帶也可以被切開後重新溶解，對各區帶進行膽固醇濃度的直接酶法檢測。另外，有報導在用薄層瓊脂糖凝膠上進行電泳分離後，可直接檢測各脂蛋白組分中的膽固醇含量的方法。
檢測試劑
（1）巴比妥-巴比妥鈉緩衝液（pH8.6±0.1、μ=0.06）：以巴比妥2.21g、巴比妥鈉12.36g於500ml蒸餾水中，加熱溶解，待冷卻至室溫後加蒸餾水至1000ml。
（2）染色液：
②氨基黑10B染色液：氨基黑10B0.1g，溶於無水乙醇20ml中，加冰醋酸5ml，甘油0.5ml使溶解。然後將磺柳酸2.5g，溶於少量蒸餾水中，加入前液，再以蒸餾水補足至100ml。
（3）漂洗液：
①30ml/L醋酸溶液：用於麗春紅染色的漂洗。
②甲醇45m，冰醋酸5ml和蒸餾水50ml混勻。用於氨基黑10B染色的漂洗。
（4）透明液：檸檬酸（C6H5Na3O7·2H2O）21g和N-甲基-吡咯烷酮150g，用蒸餾水溶解，並稀釋到500ml。亦可選用氫萘或液體石蠟透明。
（5）0.4mol/L氫氧化鈉溶液或0.1mol/L氫氧化鈉溶液。
操作方法
（1）將緩衝液加入電泳槽內，調節兩側槽內的緩衝液，使其處於同一平面。
（2）醋酸纖維素薄膜的準備：取醋酸纖維素薄膜（2cm×8cm）在毛面的一端（負極側）1.5cm處用鉛筆輕劃一橫線，做點樣標記。編號，並標明正、負極後，將薄膜置於巴比妥-巴比妥鈉緩衝液中浸泡，待充分浸透後（一般為20min）取出，夾於潔淨濾紙中間吸去多餘的緩衝液。
（3）將醋酸纖維素薄膜毛面向上貼於電泳槽支架上拉直。用微量吸管吸取無溶血血清3～5μl於橫線處沿橫線加樣，樣品應與薄膜的邊緣保持一定的距離，以免電泳圖譜中的蛋白區帶變形，待血清滲入薄膜後，反轉薄膜，使光面朝上，平直地貼於電泳槽支架上，用雙層濾紙或四層紗布將薄膜的兩端與緩衝液連通，稍待片刻。
（4）接通電源，注意醋酸纖維素薄膜上的正、負極，切勿接錯。電壓90～150V，電流0.4～0.6mA/cm（不同的電泳儀所需電壓，電流可能不同，應靈活掌握），夏季通電45min，冬季通電時間稍長，約為60min，電泳區帶展開約25～35mm即可。
（5）染色：通電完畢，取下薄膜直接浸於麗春紅S染液或氨基黑10B染色液中，染色5～10min（以白蛋白區帶染透為止），然後在漂洗液中漂去剩餘染料，直至背景無色為止。
（6）定量：
①比色法：將漂洗的薄膜吸乾，剪下各染色的蛋白區帶入相應的試管中，在白蛋白管中加0.4mol/L氫氧化鈉6ml（計算時吸光度乘以2），其餘各管加3ml，振搖數次，置37℃水箱20min使其色澤浸出。氨基黑10B染色用分光光度計在620nm處讀取各管吸光度，然後計算出各管的含量（同時做空白管對照）。
麗春紅S染色時浸出液用0.1mol/L氫氧化鈉，加入量同上法。10min後，白蛋白管內加400ml/L醋酸0.6ml（計算吸光度時乘以2），其餘各管加0.3ml，以中和部分氫氧化鈉，使色澤加深，必要時離心，取上清液用分光光度計在520nm處讀取各管的吸光度（同時作空白對照），然後計算各自的含量。
②光密度計掃描法：A.透明：吸去薄膜上的漂洗液（為防止透明液被稀釋影響透明結果），將薄膜浸入透明液中2～3min，然後取出，以滾動的方式平貼於潔淨無劃痕的載物玻璃片上（切勿產生氣泡），將此玻片豎立片刻，除去多餘透明液後，置於恆溫90～100℃的烘箱內，烘烤10～15min，取出冷卻至室溫，用此法透明的各蛋白區帶鮮明，薄膜平整，可供直接掃描和永久保存（用氫萘或液體石蠟透明，應將漂洗過的薄膜烘乾後進行透明，此法透明的薄膜不能存久，且易發生皺摺）。
③掃描定量：將已透明的薄膜放入全自動光密度計或其他光密度計暗箱內，進行掃描分析。
附註參考
樣本：可用新鮮、未冷凍的血清分離脂蛋白。血漿不適合用來做脂蛋白電泳，因為會出現一條纖維蛋白原區帶。
帶有清晰的分離組分的脂蛋白圖形是進行準確解釋的先決條件。如果能夠很好地滿足這些條件，在脂蛋白電泳和參考方法（超速離心法）之間就可以相當一致。各組分的精密度不同，用變異係數表示，估計一般都在5%以下。
偶爾α-脂蛋白會消失和（或）出現一條舌狀的窄的α-脂蛋白區帶。這是因為游離脂肪酸在α-脂蛋白上積聚，造成了這些微粒帶有電荷相等。由於α-區帶密度增大，從而導致結果偏高。和沉澱技術相比，定量脂蛋白電泳的耗資較高。
正常值
醋酸纖維薄膜電泳法：
乳糜微粒： | 0g/L（0mg/dl） |
極低密度脂蛋白： | 0.06～0.3g/L（6～30mg/dl） |
低密度脂蛋白： | <7g/L（<700mg/dl） |
高密度脂蛋白： | 男：0.52±0.11g/L（43±18mg/dl） |
女：0.55±0.13g/L（47±2mg/dl） |
臨床意義
（1）原發性高脂血症的分型與原因見表1。 
表1
表1（2）繼發性高脂蛋白血症與低脂蛋白血症的原因見表2。
表2相關疾病
1、高脂血症
2、繼發性高脂蛋白血症
