螢光偏振

螢光偏振

螢光偏振免疫分析法(fluorescencepolarizationimmunoassay,FPIA)是一種定量免疫分析技術,其基本原理是螢光物質經單一平面的藍偏振光(485nm)照射後,吸收光能躍入激發態,隨後回復至基態,並發出單一平面的偏振螢光(525nm)。

基本介紹

  • 中文名:螢光偏振
  • 外文名:fluorescence polarization immunoassay
  • 簡介:螢光偏振免疫分析法
  • 用途:常用於測定半抗原的藥物濃度
簡介,用途,

簡介

偏振螢光的強弱程度與螢光分子的大小呈正相關,與其受激發時轉動的速度呈反相關。FPIA最適宜檢測小至中等分子物質,常用於藥物、激素的測定。

用途

螢光偏振免疫分析常用於測定半抗原的藥物濃度。反應系統內除待測抗原外,同時加入一定量用螢光素標記的小分子抗原,使二者與有限量的特異性大分子抗體競爭結合。當待測抗原濃度高時,經過競爭反應,大部分抗體被其結合,而螢光素標記的抗原多呈游離的小分子狀態。由於其分子小,在液相中轉動速度較快,測量到的螢光偏振程度也較低。反之,如果待測抗原濃度低時,大部分螢光素標記抗原與抗體結合,形成大分子的抗原抗體複合物,此時檢測到的螢光偏振程度也較高。螢光偏振程度與待測抗原濃度呈反比關係。我們測定待測抗原標準品後制標準曲線。通過檢測反應系中偏振光的大小,從標準曲線上就可以精確地得知樣品中待測抗原的相應含量。

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