《藻毒素多目標廣譜特異性免疫分析分子識別基礎》是依託華南農業大學，由雷紅濤擔任項目負責人的聯合基金項目。
基本介紹
- 中文名：藻毒素多目標廣譜特異性免疫分析分子識別基礎
- 項目類別：聯合基金項目
- 項目負責人：雷紅濤
- 依託單位：華南農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
微囊藻毒素和節球藻毒素是兩類嚴重危害水資源和生態安全的毒素，目前其免疫檢測方法主要集中在一種或少數幾種毒素同時檢測，遠不能適應毒素檢測需求。本項目以微囊藻毒素和節球藻毒素多種對象為研究目標，設計出該兩類毒素的通用抗原，製備出具有廣譜特異性的單克隆抗體，建立多目標同時檢測的免疫分析方法；同時結合前期研究中已獲得的單特異性抗體，從空間識別模型、弱相互作用及其構效等3個層面深入研究抗體與兩類毒素間的識別機理，揭示上述3類抗體與藻毒素污染物間的識別規律，闡明其3個層面的分子識別及特異性差異機制。該研究對指導不同識別特性的高質量藻毒素抗體的製備及定向改造具有重要科學意義。
結題摘要
微囊藻毒素（Microcystins, MCs）和節球藻毒素（nodularin, NOD）是由銅綠微囊藻、泡沫節球藻等藻屬所產生的一類單環多肽化合物，具有強烈的肝腎毒性以及致癌作用，不僅嚴重影響環境衛生和水質，也給人們的健康造成巨大威脅。目前，藻毒素的免疫檢測方法主要集中在一種或少數幾種毒素同時檢測，遠不能適應檢測需求。本項目設計合成了12種微囊藻毒素和節球藻毒素的人工抗原及小分子通用抗原，製備出上述兩種毒素的廣譜性和特異性多克隆抗體各1種、單克隆抗體4種、重組抗體2種以及藻毒素子結構多/單克隆抗體各2種，其中廣譜性抗體能識別至少8種微囊藻毒素的異構體和節球藻毒素。建立了基於廣譜性抗體檢測不同水樣和魚肉中微囊藻毒素和節球藻毒素的酶聯免疫吸附方法（ELISA）。設計合成了三種不同結構的螢光標記物，建立了檢測不同水樣中微囊藻毒素和節球藻毒素的多組分螢光偏振免疫檢測方法（FPIA）。建立了基於納米材料的高靈敏的免疫感測器方法3種。開發了基於螢光微球和彩色微球標記的檢測水樣中微囊藻毒素免疫層析試紙條。此外，建立了基於(HESI-)UHPLC-MS/MS建立水中10種微囊藻毒素的快速定量儀器確證方法，並從昆明滇池、杭州西湖等8個水域採集了20餘份水體樣本進行了檢測。探討了敏感細胞對納米材料介導免疫原的免疫機制以及與MC-LR抗體的相互作用。同時，基於表達的重組抗體序列，構建了微囊藻毒素和節球藻毒素抗體的空間模型，研究了抗體與藻毒素分子的相互作用力類型、構效關係和作用位點，初步闡釋了藻毒素抗原-抗體的分子識別機制。依託項目共發表了學術論文39篇，其中第一標註SCI論文24篇，申請專利3項。
