簡介
薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為矽膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣,除吸附法外,也可進行分配、
離子交換、分子排阻等機理的層析,即將鋪制薄層的材料相應換為塗以
固定相的載體、
離子交換劑、凝膠等,其操作與吸附法基本相同。
過程
制板
鋪制
薄層板時,要求基底板潔淨平整,可用乾法或濕法鋪制。現常用濕法制板,即將吸附劑和粘合劑(如燒石膏)按一定比例混合,加入適量水調勻,用塗布器將此勻漿緩慢地移過基底板,放置晾乾,再經適當烘烤活化後即可使用。如不加粘合劑和水,直接將吸附劑均勻地鋪成薄層,則為乾法制板。現在市場上已有各種制好的薄層板出售,統稱預製板。
展開
有多種方式,以上行法最為常用。將薄層板垂直或傾斜放置,將展開溶劑加於低部,使之自下向上移動。下行法則為用濾紙將溶劑引至薄層上端,使其自上向下流動。平行展開時,將板平放,溶劑被吸上至薄層板點有樣品的一端,進行展開。使用圓形薄層板時,將樣品點在
圓心附近,使溶劑自圓心向
圓周方向移動,稱為環形展開或徑向展開;將樣品點在圓周位置,使溶劑自圓周向圓心移動的為向心展開,適用於f值大的組分的分離。將點樣品處附近的吸附劑颳去,使溶劑只能通過樣品點附近的較窄部分前進展開,因而溶劑前緣呈弧形的展開方式,也稱徑向展開,這種方式對較難分離的組分可能效果好些。
展開一次後取出薄層板使溶劑揮發,再用同一溶劑或換用其他溶劑再次沿此方向展開的稱多次展開。將樣品點在方形薄層板的一角,先沿著一個方向展開,然後將板轉動90°,再沿著另一方向展開的為雙向展開。多次展開和雙向展開都可加強分離效果。
特點
操作簡便,設備簡單,除
光密度計外,不需特殊設備,分離效果較好,時間較短,一塊板上可同時分離許多樣品。除低沸點物質外,各種無機和有機化合物都可進行分離。
套用和發展
廣泛套用於石油、
化工、醫藥、生化等方面。樣品用量一般為幾至幾百微克,是一種較實用、有效的微量分離分析方法。此法也可用於分離製備較大量的樣品,即使用較大較厚的薄層板,將樣品溶液在起始點處點成條帶狀,這樣可以分離毫克量樣品。