薄層層析法

薄層層析法

薄層層祈法又稱“薄層色譜分析法”。把吸附劑和支持劑均勻塗布在玻璃或塑膠板上形成薄層後進行色層分離的分析方法。將檢材中不同種類的化合物分離後,根據分離的各組分的Rf值或螢光特性可確定各組分的種類。根據斑點的面積,配合薄層掃瞄器可測定各組分含量。樣品用量少,分析速度較快,設備簡單。分離過程中對混合物的各種成分沒有改變,分離後可將不易確認的組分轉移進行其他檢驗,可做為一種處理不同種類的大量樣品時迅速篩選的方法。司法鑑定中,主要用於檢驗各種高分子有機化合物,如有機溶劑中墨水、染料、油漆、土壤中提取出的有機成分以及油脂、生物鹼、樹脂、人造纖維、有機炸藥、有機物等。

基本介紹

  • 中文名:薄層層析法
  • 外文名:Thin layer chromatography
  • 作用:分離混合物
  • 目的:分析物分離
  • 優點:操作簡便,設備簡單
  • 套用:石油、化工、醫藥、生化
簡介,過程,制板,展開,特點,套用和發展,

簡介

薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為矽膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣,除吸附法外,也可進行分配、離子交換、分子排阻等機理的層析,即將鋪制薄層的材料相應換為塗以固定相的載體、離子交換劑、凝膠等,其操作與吸附法基本相同。

過程

制板

鋪制薄層板時,要求基底板潔淨平整,可用乾法或濕法鋪制。現常用濕法制板,即將吸附劑和粘合劑(如燒石膏)按一定比例混合,加入適量水調勻,用塗布器將此勻漿緩慢地移過基底板,放置晾乾,再經適當烘烤活化後即可使用。如不加粘合劑和水,直接將吸附劑均勻地鋪成薄層,則為乾法制板。現在市場上已有各種制好的薄層板出售,統稱預製板。

展開

有多種方式,以上行法最為常用。將薄層板垂直或傾斜放置,將展開溶劑加於低部,使之自下向上移動。下行法則為用濾紙將溶劑引至薄層上端,使其自上向下流動。平行展開時,將板平放,溶劑被吸上至薄層板點有樣品的一端,進行展開。使用圓形薄層板時,將樣品點在圓心附近,使溶劑自圓心向圓周方向移動,稱為環形展開或徑向展開;將樣品點在圓周位置,使溶劑自圓周向圓心移動的為向心展開,適用於f值大的組分的分離。將點樣品處附近的吸附劑颳去,使溶劑只能通過樣品點附近的較窄部分前進展開,因而溶劑前緣呈弧形的展開方式,也稱徑向展開,這種方式對較難分離的組分可能效果好些。
展開一次後取出薄層板使溶劑揮發,再用同一溶劑或換用其他溶劑再次沿此方向展開的稱多次展開。將樣品點在方形薄層板的一角,先沿著一個方向展開,然後將板轉動90°,再沿著另一方向展開的為雙向展開。多次展開和雙向展開都可加強分離效果。

特點

操作簡便,設備簡單,除光密度計外,不需特殊設備,分離效果較好,時間較短,一塊板上可同時分離許多樣品。除低沸點物質外,各種無機和有機化合物都可進行分離。

套用和發展

廣泛套用於石油、化工、醫藥、生化等方面。樣品用量一般為幾至幾百微克,是一種較實用、有效的微量分離分析方法。此法也可用於分離製備較大量的樣品,即使用較大較厚的薄層板,將樣品溶液在起始點處點成條帶狀,這樣可以分離毫克量樣品。

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