基本介紹
- 中文名：葡萄糖檢測試劑盒
- 外文名：GlucoseAssay Kit
- 管理類別：Ⅱ類醫療器械
- 分類名稱：臨床檢驗分析儀器
分類,原理,使用方法,葡萄糖檢測的意義,樣本採集與處理,試劑的儲存,注意事項,參考文獻,
分類
按檢測原理不同分為以下三類：
1. 葡萄糖檢測試劑盒[己糖激酶法(HK法)]
2. 葡萄糖檢測試劑盒[葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法)]
3. 葡萄糖檢測試劑盒[電極法]
原理
1. 己糖激酶法(HK法)
葡萄糖 + ATP
G-6-P+ ADP
G-6-P + NAD+
6-磷酸葡萄糖+NADH + H
NADH在340/380nm的吸光度變化與標本中存在的葡萄糖數量成正比，可在340/380nm波長處進行吸光度測定，同時與標準品吸光度比較，從而計算出樣本中葡萄糖的濃度。
2. 葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法)
葡萄糖+O2+H2O 
葡萄糖酸+H2O2
H2O2+苯酚+4-氨基安替比林 
醌亞胺色素+H2O
上述反應生成的紅色醌亞胺色素與樣本中葡萄糖的濃度成正比，可在500nm（490至520nm）波長處進行吸光度測定，同時與標準品吸光度比較，從而計算出樣本中葡萄糖的濃度。
計算公式
葡萄糖濃度（mM）=（測定管吸光度-空白管吸光度）/（標準管吸光度-空白管吸光度）×標準濃度
3. 電極法
葡萄糖氧電極置於含有適量葡萄糖氧化酶的溶液中，當加入樣品後，樣品中的葡萄糖被氧化而消耗氧。由於氧消耗量與血糖濃度呈正比，而電極的極限擴散電流又與溶液中的氧含量呈正比，因此，氧電極值即可反映樣品中血糖濃度。
使用方法
1. 葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法)
取3支試管，編號，按下表操作（可根據使用檢測儀器調整樣品與工作液體的使用量）：
加入物(mI) | 空白管 | 標準管 | 測定管 |
待測樣本 | — | — | 0.02 |
葡萄糖標準液 | — | 0.02 | — |
生理鹽水 | 0.02 | — | — |
酶酚混合液 | 3.0 | 3.0 | 3.0 |
混勻，置37℃水浴中保溫15 min，在波長500 nm處比色，以空白管調零，讀取標準管及測定管吸光度。
2. 葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法)
取3支試管，編號，按下表操作（可根據使用檢測儀器調整樣品與工作液體的使用量）：
加入物(mI) | 空白管 | 標準管 | 測定管 |
待測樣本 | — | — | 0.02 |
葡萄糖標準液 | — | 0.02 | — |
生理鹽水 | 0.02 | — | — |
HK | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
混勻，置37℃水浴中保溫15 min，在波長340 nm處比色，以空白管調零，讀取標準管及測定管吸光度。
3. 電極法
首先將氧電極置於含有適量葡萄糖氧化酶的溶液中，然後加入待測樣品，樣品中的葡萄糖被氧化而消耗氧。由於氧消耗量與血糖濃度呈正比，而電極的極限擴散電流又與溶液中的氧含量呈正比，因此，氧電極值即可反映樣品中血糖濃度。
葡萄糖檢測的意義
血液中葡萄糖，主要來自食物。它是糖在體內的運輸形式，通過糖元生成與糖元分解、糖元異生與糖元酵解、脂肪形成與解脂作用間的相互調節和平衡，血糖的相對恆定對維持機體正常生理功能有重要意義。
葡萄糖升高：高血糖症最常見的是糖尿病。胰腺炎、胰腺癌等瀰漫性胰腺疾患，空腹血糖可增高，除嚴重病例外，一般不超過8.3mM。抽搐及某些疾病終期，糖元分解加速可出現輕度高血糖；窒息可引起酸中毒及糖原分解增多，結果出現高血糖。感染性疾病、毒血症以及顱內疾患，由於機體內對病理損傷的反應，可能出現明顯的高血糖。麻醉往往可出現高血糖，血糖升高的程度與麻醉種類和時間長短有關，並出現尿糖。
葡萄糖降低：血糖值低於2.8mM，可診斷為低血糖。最多見於接受超劑量胰島素治療的糖尿病患者。胰島β-細胞瘤患者可出現嚴重的低血糖，有時降至零，這種情況常見於清晨或肌餓禁食時出現。甲狀腺功能低下、腦垂體功能低下和腎上腺皮質功能低下患者，血糖可降至正常範圍以下。由於肝糖原分解過程中某些酶的缺陷而引起的肝糖元累積病，糖元不能轉化為葡萄糖，也可能出現低血糖。慢性腹瀉吸收不良及脂肪瀉，由於葡萄糖吸收障礙可使血糖降低；有些胃次全切除術後的患者可出現餐後一時性低血糖，或稱反應性低血糖。另外，劇烈運動可產生低血糖。肝臟病由於肝糖元貯備不足，有時可出現低血糖。
樣本採集與處理
1. 靜脈採血：除非是臥床的病人，一般在採血時取坐位。
2. 標本類型：無溶血的血清或肝素化的血漿。
3. 標本穩定性：樣本須在30分鐘內分離血清或血漿，2～8℃下冷藏的血清或血漿可穩定24小時，-20℃冰凍起來可穩定1個月。
4. 樣本處理：血標本應儘快送檢驗室。室溫下放置10-15min後離心分離血清或血漿置樣品杯中待測。
試劑的儲存
1. 未開封的試劑於2-8℃保存，穩定至有效期。
2. 已開封的試劑在陰暗處（2-8℃）可穩定一個月。
3. 避光保存，用後立即蓋好封蓋。
4. 發現試劑中有沉澱物禁止使用。
注意事項
1. 葡萄糖氧化酶法可直接測定腦脊液葡萄糖含量，但不能直接測定尿液葡萄糖含量。因為尿液中尿酸等干擾物質濃度過高，可干擾過氧化物酶反應，造成結果假性偏低。
2. 對於血液樣品需及時分離血細胞，因為紅細胞的酵解會導致測定結果偏低。建議測定樣品以草酸鉀-氯化鈉為抗凝劑抑制糖酵解。
3. 嚴重黃疸，溶血及乳糜樣血清應先製備無蛋白血濾液，再進行測定。
參考文獻
[1] 尚紅著.全國臨床檢驗操作規程[M].北京：人民衛生出版社,2015,359-364.
[2] 費維倫,梁春陽.3種血清葡萄糖測定方法的比較[J].檢驗醫學與床,2012,9(20):2573-2574.
