《自噬在內皮祖細胞促進血栓機化再通中的作用研究》是依託蘇州大學，由李曉強擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：自噬在內皮祖細胞促進血栓機化再通中的作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李曉強
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
自噬在細胞的生長、發育和疾病發生中起著重要的作用，與血管生成也有著密切的聯繫，而探討自噬在深靜脈血栓中扮演的角色及作用機制，是研究深靜脈血栓發生髮展機制中的一個新思路。本課題是深靜脈血栓研究的重要組成部分，我們在前期成功誘導培養鑑定EPCs，體內移植EPCs能加快血栓機化再通的基礎上探討：1.自噬的抑制與激活對內皮祖細胞的生存作用影響；2.Ⅲ型PI3K特異性阻斷劑Baflomycin A對HUVECs（人臍靜脈內皮細胞）增殖作用及微血管形成的作用影響；3.探討自噬/溶酶體參與內皮細胞增殖的分子機制。
結題摘要
背景：深靜脈血栓是血管外科多發病, 慢性期可導致血栓后綜合征，治療困難。血栓的機化和再通是血栓內新生毛細血管形成的過程。內皮祖細胞(endothelial progenitor cells, EPCs)是可以分化為成熟內皮細胞的一類幹細胞群。研究表明，EPCs參與各種生理及病理性血管新生。在前期的工作中我們培養大鼠骨髓源性EPCs，並將EPCs移植到靜脈血栓大鼠體內，移植細胞組血栓內毛細血管數目明顯高於對照組，表明EPCs能加速血栓的機化和再通。方向：EPCs促進加速血栓機化再通為慢性深靜脈血栓的治療提供了一個新的思路。但實驗中存在諸多問題，如EPCs增殖遷移能力差，細胞移植需要量大，細胞易老化，細胞在體內增殖慢，存活量少，血栓部位血管內皮細胞凋亡在增加，局部炎症持續時間長等。目前研究發現血管生成與自噬密切相關，雷帕黴素能降低外周血EPCs的數量及功能。我們推測其原因是雷帕黴素誘導細胞自噬的發生，過度自噬導致細胞損傷，而一定程度的自噬調節，或許能促進細胞增殖或凋亡。主要內容：在本課題中，我們採用激活及抑制自噬兩種途徑，觀察兩種干預對EPCs的生存影響及探討自噬在血栓機化再通中的作用。結果：（1）隨雷帕霉濃度增加EPCs增殖率逐漸降低甚至死亡，凋亡率和自噬增加。（2）低濃度3-甲基腺嘌呤(3-methlyadenine, 3-MA)對EPCs的增殖及凋亡無明顯影響，5mmol/l組對EPCs有增殖促進作用，10mmol/l組抑制EPCs增殖並促進EPCs凋亡並影響細胞周期的分布。（3）自噬激活能抑制人臍靜脈內皮細胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECS）的增殖、促其凋亡；調控自噬可影響細胞因子的表達水平。（4）激活自噬可使Lamp-2a表達升高，上調CMA，LC3-II表達減少。抑制自噬下調CMA，大自噬活性增強。CMA和大自噬之間表現出功能互補的關係。（5）移植EPCs到大鼠慢性深靜脈血栓體內，雷帕黴素干預組可影響EPCs在體記憶體活，且呈劑量相關性，並影響血栓內部的毛細血管密度；一定濃度的3-MA可提高EPCs在血栓內部的存活率，並可提高血栓內部毛細血管密度。意義：（1）自噬調節可影響EPCs增殖及凋亡，進而可能會影響血管生成（2）可通過調控自噬調節血栓的機化再通（3）幹細胞的自噬及凋亡或許是靶向治療的新方向。
