膠體金免疫電鏡技術

膠體金免疫電鏡技術多採用包埋後染色,此方法具有敏感性高、重複性好、節約抗體、能同時進行多重標記等優點,是目前最常用的免疫染色方法。包埋後染色的缺點主要是標本的前期處理常導致抗原失活。標本是否新鮮、固定劑和包埋劑的種類、固定時間、聚合溫度、蝕刻劑的使用、抗體和金探針的純度及稀釋倍數、孵育時間等因素都會對實驗結果產生影響。

與光鏡免疫標記方法一樣,膠體金免疫電鏡技術的影響因素甚多,關鍵在於能在保存良好的超微結構的前提下保護好抗原的活性。實驗中多採用聚甲醛加少量戊二醛的混合固定液,免疫反應前使用蝕刻劑除去組織表面的樹脂,孵育過程在恆溫下進行,這些措施均有利於保持抗原的活性。

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