《膠質細胞活化的Wnt信號途徑與中腦多巴胺穩態調控研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由陳良為擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：膠質細胞活化的Wnt信號途徑與中腦多巴胺穩態調控研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳良為
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
資料表明腦內膠質細胞活化是影響帕金森病（PD）進程的重要因素，但目前對於其活化增殖的關鍵調控機制尚不清楚。我們前期研究發現：星形膠質活化早而短暫、具有神經營養特性，小膠質活化晚而持久、產生神經毒性效應；Wnt信號作為調節細胞增殖分化的主要因子、定位表達於活化膠質細胞。我們推測：Wnt/β-catenin信號可能具有調控膠質細胞活化增殖、多巴胺穩態和PD疾病進程的重要作用。本項目擬通過：（1）採用Wnt報告基因鼠PD模型，分析Wnt/β-catenin激活與星形膠質、小膠質細胞活化的關係；（2）套用細胞共培養，明確激活Wnt信號促進星形膠質活化、營養因子合成和神經保護作用，阻斷Wnt信號對小膠質活化、炎症因子分泌和神經毒性的抑制作用；（3）運用體內干預實驗，探討早期激活/晚期抑制膠質細胞Wnt信號的神經保護、多巴胺穩態和疾病治療效果，闡明膠質細胞活化的Wnt信號調控機制及PD干預治療新靶點價值。
結題摘要
項目主要目標是研究中腦膠質細胞功能活化的Wnt信號調節機制及其多巴胺神經元保護意義，課題通過TOPgal（Wnt-reporter小鼠）、MPTP誘導小鼠PD模型、細胞培養體系、RT-PCR、Western blot、MTT、ELISA、siRNA干涉、流式細胞術、免疫細胞化學、雷射共聚焦顯微鏡觀察等方法，研究Wnt/β-catenin信號參與星形膠質細胞和小膠質細胞功能活化、選擇性干預的生物效應問題，結果發現：（1）中腦黑質星形膠質細胞具有Wnt信號通路分子Wnt1、Wnt3a、Wnt5a、β-catenin等陽性定位，表明Wnt/β-catenin信號是星形膠質細胞的重要調控因子；（2）MPTP誘導PD狀態下，黑質星形膠質細胞和小膠質細胞明顯活化、Wnt信號分子表達水平變化（上調為主）和多巴胺神經元丟失，表明Wnt/β-catenin信號激活可能與膠質細胞功能活化和多巴胺神經元生存活力的調節有關。（3）體外培養狀態下，Wnt信號激動劑LiCI或Wnt信號抑制劑IWR-1處理對於星形膠質細胞增殖活力無顯著影響，但Wnt-inducible Gas1表達水平上調能夠誘導LPS炎症刺激星形膠質細胞自身的凋亡發生；（4）MPTP模型體內狀態下，Wnt信號激動劑LiCI能夠減輕MPTP誘導的TH表達下降或中腦多巴胺神經元丟失。另外，星形膠質細胞針對不同炎症刺激呈現M1和M2樣極化現象，其可塑性變化和Wnt相關調節因子是一個引人關注的新問題。本研究結果提示Wnt/β-catenin信號通路參與星形膠質細胞的功能活化調節，適度激活Wnt信號促進星形膠質細胞的神經保護作用，但選擇性干預Wnt信號通路方法和PD疾病治療價值有待進一步研究闡明。
