腸道產KPC型碳青黴烯酶細菌定植的微生物生態機制研究

腸道產KPC型碳青黴烯酶細菌定植的微生物生態機制研究

《腸道產KPC型碳青黴烯酶細菌定植的微生物生態機制研究》是依託浙江大學,由葛超榮擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

  • 中文名:腸道產KPC型碳青黴烯酶細菌定植的微生物生態機制研究
  • 依託單位:浙江大學
  • 項目負責人:葛超榮
  • 項目類別:青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

本項目在套用微生態系統理論基礎上,以揭示腸道耐藥微生物定植與微生物生態失衡的聯繫機制為目標,採用脈衝場凝膠電泳、定量PCR、末端限制性片段長度多態性、磷脂脂肪酸法、高通量測序等新興微生物生態測試技術,調查產KPC型碳青黴烯酶細菌的流行特點、在腸道內的定植情況及其耐藥特徵,同時研究腸道微生物群落的組成結構多樣性和分子生態特徵,明確表征耐藥菌定植抗力的腸道微生物生態指標,闡明腸道內產KPC型碳青黴烯酶細菌與正常微生物菌群之間的相互作用和聯繫,揭示產KPC型碳青黴烯酶細菌定植的微生物生態機制。預期成果對闡明耐藥微生物在人體內的定植傳播機理有重要意義,為預防和控制耐藥微生物對人類健康的危害提供科學依據和新的思路。

結題摘要

由於缺乏針對產KPC型碳青黴烯酶細菌所致感染的有效治療藥物,有關KPC的研究已成為抗感染領域專家的研究重點之一。本項目通過收集浙江大學醫學院附屬第一醫院重症監護室的臨床樣本,調查了產KPC型碳青黴烯酶細菌在腸道的定植情況及其流行特點。發現腸道碳青黴烯類抗生素不敏感菌的分離率為30.4%,顯著高於同時期同病房臨床的碳青黴烯類抗生素不敏感菌分離率。腸道分離碳青黴烯類抗生素不敏感菌中腸桿菌細菌比例為31.1%,明顯高於臨床分離株的12.1%。腸道分離的碳青黴烯類抗生素不敏感菌中出現一些臨床不常見卻在環境中易出現的細菌。PFGE顯示腸道分離菌的同源性顯著低於臨床分離株。利用Southern雜交及PCR步移法等方法,對我國首次發現的產KPC銅綠假單胞菌和植生拉烏爾菌進行了耐藥性、同源性、KPC基因定位及其基因環境的研究,發現銅綠假單胞菌和植生拉烏爾菌的KPC基因分別定位於染色體和質粒上,並發現上述細菌中的KPC基因周圍最長達7498-bp的序列和中國流行的存在於腸桿菌科細菌的KPC基因周圍序列相同。本課題還對該產KPC的全耐藥銅綠假單胞菌進行了全基因組測序以研究其KPC基因更遠範圍的周圍序列和來源。套用多末端限制性片段長度多態性技術,研究了腸道微生物群落組成、結構、多樣性和分子生態特徵,結果表明碳青黴烯抗生素耐藥菌定植時,真菌和古菌的末端限制性片段長度多態性有顯著改變,揭示了腸道微生物生態與耐藥菌定植密切相關。

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