《腦卒中後HMGB1釋放對T細胞免疫功能抑制的效應及機制研究》是依託武漢大學，由古麗娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：腦卒中後HMGB1釋放對T細胞免疫功能抑制的效應及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：古麗娟
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腦卒中誘導的免疫抑制(SIID)，以淋巴細胞數量減少、功能改變為特徵，是患者繼發感染，愈後較差的重要原因，目前機制不完善，缺乏特異性治療手段。我們前期工作發現，T細胞是SIID的關鍵因素；而體外研究報導，細胞因子樣蛋白-高遷移率族蛋白B1(HMGB1) 小劑量促進而大劑量抑制T細胞介導的免疫應答，提示其可調控T細胞功能。腦卒中後HMGB1大量釋放入血已被證實；預實驗中，我們發現，腦缺血再灌注損傷（CIRI）大鼠，血漿HMGB1水平升高而脾臟和血液T細胞數量減少，抑制HMGB1釋放，T細胞數量增加。因此，我們推測，腦卒中後HMGB1釋放可能通過介導T細胞數量和功能改變誘導免疫抑制。本項目擬利用大鼠CIRI模型，採用多種免疫學及分子生物學實驗技術，探討腦卒中後HMGB1對T細胞免疫功能改變的效應及受體、信號轉導機制。本項目將從新的視角揭示SIID的發生機制，為腦卒中及繼發感染的防治提供新靶標。
結題摘要
腦缺血再灌注損傷（CIRI）誘導腦組織炎症反應和外周免疫抑制（SIID）雙向效應，目前機制不明。CIRI致壞死神經元釋放高遷移率蛋白B1(HMGB1)，其致炎效應與浸潤入腦的T細胞有無關聯，尚未可知。CIRI後HMGB1經破損血腦屏障釋放入血，外周高水平HMGB1是否介導SIID，尚無報導。本項目採用局灶性腦缺血再灌注損傷模型及HMGB1抑制劑Glycyrrhizin，觀察CIRI後，HMGB1在缺血腦組織的表達、定位，腦組織炎症反應，外周器官T細胞數量和功能以及HMGB1對T細胞作用的受體信號，同時利用T細胞缺陷動物，離、在體觀察T細胞對HMGB1效應的影響及二者的相關性。結果：①CIRI 12 h，HMGB1從神經元胞核轉至胞漿，48 h釋放至胞外伴神經元數量減少；同時，CIRI 24 h腦脊液和血漿檢測到高水平HMGB1表達；②CIRI 後缺血區小膠質細胞/巨噬細胞、中性粒細胞以及淋巴細胞及其亞型數量增多，浸潤的小膠質細胞/巨噬細胞表達HMGB1；③Glycyrrhizin致大鼠腦梗塞體積減小，神經元死亡減少，HMGB1轉位和胞外釋放減輕，缺血區小膠質細胞/巨噬細胞、中性粒細胞和淋巴細胞浸潤減輕；④Glycyrrhizin減小野生型（WT）MCAO、dMCAO大鼠及MCAO小鼠腦梗塞體積，但在裸大鼠及T、B聯合缺陷SCID小鼠中，腦保護作用喪失；SCID小鼠接受WT脾細胞過繼回輸，腦梗塞體積增大，此增大被Glycyrrhizin抑制；Glycyrrhizin改善離體WT而非SCID脾細胞與神經元共培養體系中脾細胞誘導的神經元死亡；⑤Glycyrrhizin顯著抑制MCAO 誘導的大鼠腦脊液和血清HMGB1水平增高；⑥與HMGB1升高相反，MCAO後外周血及脾臟單個核細胞總數，尤其是淋巴細胞及其亞型數量減少，Glycyrrhizin抑制血清高水平HMGB1釋放的同時，顯著改善淋巴細胞數量的減少；⑦MCAO誘導Th1型細胞因子IL-2和IFN-γ 基因表達下降，Glycyrrhizin改善CIRI誘導的淋巴細胞功能抑制，促進輔助性T細胞向Th1漂移；⑧抗RAGE抗體逆轉HNGB1介導的T細胞免疫功能抑制，促進Th1極化。本項目的意義在於將HMGB1作為靶標，既改善中樞炎症反應腦損傷，又調控其對T細胞功能的抑制，改善SIID，為腦卒中及繼發感染治療提供理論和實驗依據
