胺基酸放射自顯影(amtno acid autoradiography)是一種示蹤方法。將帶有同位素標記的胺基酸進行放射自顯影,通過軸漿輸送由胺基酸台成的蚩白分子這一過程而實現。具體操作:將帶有放射性的胺基酸注入動物腦內某一特定的區域,讓該區的神經細胞吸收併合成蛋白質;待其中 有蛋白質分子被送到軸突的終端時。
基本介紹
- 中文名:胺基酸放射自顯影
- 外文名:amtno acid autoradiography
胺基酸放射自顯影(amtno acid autoradiography)是一種示蹤方法。將帶有同位素標記的胺基酸進行放射自顯影,通過軸漿輸送由胺基酸台成的蚩白分子這一過程而實現。具體操作:將帶有放射性的胺基酸注入動物腦內某一特定的區域,讓該區的神經細胞吸收併合成蛋白質;待其中 有蛋白質分子被送到軸突的終端時。
胺基酸放射自顯影(amtno acid autoradiography)是一種示蹤方法。將帶有同位素標記的胺基酸進行放射自顯影,通過軸漿輸送由胺基酸台成的蚩白分子這一過程而實現。具體操作:將帶有放射性的胺基酸注入動物腦內...
例如將125I注入體內可觀察碘在甲狀腺內的碘化部位及過程;又如把3H標記的胸腺嘧啶苷或胺基酸注入體內,可以研究細胞內DNA合成及蛋白質合成及其代謝過程。還可對標本中銀顆粒數目進行定量分析;也可用液體閃爍計數器對細胞或勻漿的放射強度進行定量研究。原理 免疫放射自顯影 放射自顯影的原理是利用放射性同位素所發射出來...
在醫藥學中,示蹤劑被套用於一些檢驗,比如Tc在放射自顯影(Autoradiography)和核醫學(nuclear medicine),包括單光子發射計算機斷層顯像(SPECT),正電子發射斷層掃描(PET)和顯像。在為幽門螺旋桿菌(helicobacter pylori)所做的尿素呼氣試驗的常用劑量為經C標記的尿素檢測幽門螺旋桿菌的感染與否。如果標記的尿素被...
凝膠成像主要用於蛋白質、核酸凝膠成像及分析,系統提供白光和紫外光以及藍光光源進行拍攝凝膠,由系統自帶的圖像捕捉軟體捕捉拍攝圖像,然後由系統自帶的圖像分析軟體對拍攝的圖像進行分析。凝膠成像定義 圖像分析程式,適用於ID膠、斑點/狹縫印跡、平板、菌落、放射自顯影、多排膠、蛋白膠、GFP、PCR、考馬斯亮藍及銀染的...
如果是用同位素標記樣品,其後的信號檢測即是放射自顯影,通過放射自顯影顯示雜交信號的強弱與分布;若用螢光標記,則需要一套螢光掃描及分析系統,對相應探針陣列上的螢光強度進行分析比較,經計算機軟體如Genepix 3.0軟體ImaGene 3.0軟體分析,將圖像數位化,即可獲得有關的生物信息。目前,用於晶片的螢光信號掃描和...
通過與電泳法和放射自顯影法結合,獲得雜交圖譜,再進行定性或定量分析。分子雜交方法廣泛用於生物化學、分子生物學中作為核酸片段鹼基序列的檢測與鑑定手段。在醫學領域中已用於某些病毒或細菌引起的感染性疾病的診斷。它也可用於基因工程。不同來源蛋白質的亞基結合過程也可稱為雜交。分子雜交(molecular hybridization)不...
DNA型探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA型探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或螢光染料等標記後製成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合,經放射自顯影或其他檢測手段就可以進行判定。對於...
從示蹤套用的角度,將核素碳14與氚比較可見:碳14具有較長的半衰期(5730年),雖有核素利用率低、摩爾比活度低等缺點(故在 DNA順序的研究和放射免疫分析等方面不採用碳14標記化合物),但在使用中無需對其衰變進行校正;碳14的β粒子的能量比氚的高;雖然其自顯影的解析度較低,但計數效率高;碳在分子中所處位置...
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或螢光染料等標記後製成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合,經放射自顯影或其他檢測手段就可以判定膜上是否有同源...
實驗1-10 植物傷流液中糖、胺基酸及礦質元素的點滴分析 第二章 礦質營養 實驗2-1 植物的元素缺乏症(溶液培養)實驗2-2 單鹽毒害及離子間拮抗作用 實驗2-3 植物對離子的選擇性吸收 實驗2-4 離體根對銨離子的交換吸收 實驗2-5 氧對小麥離體根吸收K+的影響 實驗2-6 植物對磷的吸收和運輸(放射自顯影,...
2)、胺基酸自體放射攝影術 方法與原理:神經元將帶有核素的胺基酸合成為蛋白質,後者沿著的軸突被輸送到軸突的終端。用放射自顯影方法了解神經元軸突的走向以及聯繫。3)、辣根氧化酶追蹤法 方法與原理:利用神經元的代謝,用組織化學的防哪個法,了解神經元軸突的走向以及聯繫。腦損傷法 利用天然或實驗的方法,造成...
從白血病患者白細胞中抽提的基因組DNA,經一組限制性內切酶消化及瓊脂糖凝膠電泳分離後轉移到尼龍膜上,用取自M-bcr3’和5’端的bcr探針與之雜交。放射自顯影洗片後即可顯示所要檢測的條帶,對於CML患者,除可見到一條與胚系bcr基因組DNA相對應的條帶外,其他的條帶說明存在重排的bcr等位基因。RT-PCR 採用異硫...
3.蛋白質和肽的放射性碘化 4.銀染法檢測凝膠中的蛋白質:一種與質譜分析兼容的方法 5.用SYPR染料螢光檢測凝膠中的蛋白質 6.放射自顯影法和螢光自顯影法:基於膠片的平面標本放射性成像技術 Ⅱ基於蛋白質分離的蛋白質組學分析 7.自由流電泳 8.基於凝膠的蛋白質組學:蛋白質的高分辨雙向凝膠電泳.等電聚焦和非...
雜交後,洗去膜上的未組合的探針,將Ⅹ線膠片覆於膜上,在暗盒中日光進行放射自顯影。結合了同位素標記探針的DNA片段所在部位將顯示黑色的雜交帶,基因的缺失或突變則可能導致帶的缺失或位置改變。分子雜交是基因探測的基礎,除了用印跡雜交外,還有斑點雜交法。即將DNA樣品變性後直接點在硝酸纖維濾膜上,再與探針雜交...
二、放射自顯影神經追蹤法 三、2-脫氧葡萄糖(2-DG)法 四、PHA-L順行軸突追蹤法 五、生物胞素和神經生物素 六、生物素化葡聚糖 七、霍亂毒素 八、螢光追蹤劑及其追蹤法 九、病毒示蹤法 十、細胞內注射染料 十一、選擇追蹤劑的標準 十二、逆行追蹤的定量 十三、化學損傷技術 十四、組織化學和螢光組織化學技術 ...
20世紀70年代關於神經遞質受體的生化研究、它們位點的放射自顯影研究,以及神經多肽的免疫組織化學研究,更是進一步促進了神經生理學家、神經解剖學家、神經化學家和神經藥理學家們的對話。而過去兩個世紀以來,分子生物學技術手段的套用更加豐富了這一交流。神經科學的爆炸性發展也體現在神經科學學會(Society。for ...
二、放射自顯影神經追蹤法 三、2-脫氧葡萄糖(2-DG)法 四、PHA-L順行軸突追蹤法 五、生物胞素和神經生物素 六、生物素化葡聚糖 七、霍亂毒素 八、螢光追蹤劑及其追蹤法 九、病毒示蹤法 十、細胞內注射染料 十一、選擇追蹤劑的標準 十二、逆行追蹤的定量 十三、化學損傷技術 十四、組織化學和螢光組織化學技術 ...
分析時先提取人類α珠蛋白信使核糖核酸(mRNA),用反向轉錄酶製備互補DNA(cDNA),再將cDNA用32P標記,然後與從羊水細胞中分離獲得的DNA進行分子雜交,再用放射自顯影的吸印法來檢查,即可判定是否有珠蛋白基因存在。在某些情況下,限制性核酸內切酶的方法更為優越。由於基因突變可以造成某種限制酶切點的喪失或新切點...
1.3.1 SDS-PAGE法 根據藥物Mr的大小選擇不同濃度的凝膠電 泳,通過控制電流等條件使得原 藥與其它產物分開,然後通過切割膠條放射計數或放射自顯影的方法,來檢測電泳放射性圖 譜。該法具有較高的解析度和靈敏度,但電泳過程中,125I-小肽和游離 125I可能擴散至空白凝膠或電解液中,從而使結果可能偏高。1.3...
探針可用放射性同位素標記,通過放射自顯影的方法檢測,也可以用非放射性標記如地高辛、生物素、過氧化物酶等進行相應的標記物檢測。5、PCR-SSP法:序列特異性引物分析即根據各等位基因的核苷酸序列,設計出一套針對每一等位基因特異性的(allele-specific)、或組特異性 (group-specific)的引物,此即為序列特異性...
愈傷組織細胞在一種包含所有必需物質的培養基中培養了幾個小時,其中一種化合物具有放射性(氚標記)當這些細胞被固定後鏡檢,利用放射自顯影技術發現放射性物質集中於細胞核、線粒體和葉綠體,可以肯定標記的化合物是胸腺嘧啶脫氧核苷酸。水稻愈傷 在外植體上形成以後,愈傷組織的繼承培養在已充分發育,但沒有出現老化現象...
2、新技術的套用:植物實驗胚胎學藉助各種近代的物理和化學的手段,例如透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、 X射線、放射自顯影、螢光免疫技術、超微組織化學和其他生物化學、細胞生物學等方面的新技術,使植物實驗胚胎學的研究提高到分子水平,並進一步向廣度和深度發展。起源和發展 德國植物胚胎學 一般認為植物實驗胚胎學...
細胞水平微吸收(Cellular micro absorption),研究放射性藥物在小鼠肝臟細胞的微吸收劑量分布,試圖建立估算的數學模式。 方法,採用冰凍切片光鏡放射自顯影技術,研究99Tcm-甲氧基異丁基異腈( MIBI)在小鼠肝臟細胞內細胞水平的分布。實驗表明99Tcm-MIBI 在肝臟細胞水平的分布是不均勻的,肝細胞核微吸收劑量數值與利用...
其分析原理是含有蛋白激酶活性的樣品先固定於硝酸纖維素膜上(點滴或真空抽吸),然後將濾膜浸入合適的蛋白底物溶液中,底物蛋白質與剩餘的膜結合位點結合,然後加入同位素標記的ATP,作用一定時間後洗去膜上未反應的ATP並終止反應,參入物經放射自顯影或液閃計數定量,與膜結合的酶和底物均具有一定的運動性,兩者反應的...
首先製備一段帶有放射性標記的已知特異序列的DNA,將要檢測的細胞抽提物與標記DNA混合,進行凝膠電泳。未結合蛋白的自由DNA在凝膠上遷移最快,而與蛋白質結合的DNA遷移慢,一般結合的蛋白質分子越大,DNA分子的延滯現象越明顯,然後通過放射自顯影分析,即可發現一系列DNA帶譜,每條帶分別代表不同的DNA-蛋白質複合物。...
一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性並在原位將單鏈DNA片段轉移至尼龍膜或其他固相支持物上,經乾烤或者紫外線照射固定,再與相對應結構的標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,...
探針可用放射性同位素標記,通過放射自顯影的方法檢測,也可以用非放射性標記如地高辛、生物素、過氧化物酶等進行相應的標記物檢測。5. PCR-SSP法:序列特異性引物分析即根據各等位基因的核苷酸序列,設計出一套針對每一等位基因特異性的(allele-specific)、或組特異性 (group-specific)的引物,此即為序列特異性引物...
1.3.1 SDS-PAGE法 根據藥物Mr的大小選擇不同濃度的凝膠電 泳,通過控制電流等條件使得原 藥與其它產物分開,然後通過切割膠條放射計數或放射自顯影的方法,來檢測電泳放射性圖 譜。該法具有較高的解析度和靈敏度,但電泳過程中,125I-小肽和游離 125I可能擴散至空白凝膠或電解液中,從而使結果可能偏高。1.3...
(3)在核膜殘缺的情況下,核膜對核的保護喪失,溶酶體可以溶解染色質,而引起細胞突變;(4)溶酶體代謝過程中的某些產物是腫瘤細胞增殖的物質基礎;(5)致癌物質進入細胞,在與染色體整合之前,總是先貯存在溶酶體中,這已為放射自顯影所證實。總之,溶酶體與腫瘤發生是否有直接關係,尚待進一步探索。
舒必利為示蹤劑建立受體的放射竟爭結合法,求出化合物的IC50值並進行了篩選,結果表明與用CND O/2法計算結論相一致,對篩選後的化合物進行了與受體結合特性研究,並測定了Kd值及大鼠腦的放射性自顯影.採用改進的CND 0/2I法探討了23種Benyamide類D2受體顯像劑的構效關係,初步提出了有關D2受體顯像劑與體內胺基酸...