《胰腺癌誘導DC分化和DC-SIGN表達的microRNA調控機制研究》是依託浙江大學，由曹利平擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：胰腺癌誘導DC分化和DC-SIGN表達的microRNA調控機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：曹利平
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胰腺癌是惡性程度最高、預後最差的惡性腫瘤之一，研究胰腺癌的免疫逃逸機制及抑制方法對探索胰腺癌的生物治療，改善預後具有重要意義。本課題組前期研究發現DC-SIGN在介導腫瘤細胞粘附與免疫逃逸中發揮作用，但目前對於腫瘤細胞與樹突狀細胞(DC)間的相互作用的機制仍然不清楚。本項目擬通過檢測DC分化過程中microRNA（微小RNA,miRNA）表達譜變化及其與DC-SIGN等DC細胞表型的關係，利用生物信息學工具篩選並驗證直接調控DC-SIGN基因表達的miRNA分子，闡明DC分化過程中調控DC-SIGN表達的分子機制；通過DC-SIGN介導的胰腺癌-DC粘附試驗，研究胰腺癌細胞與DC間相互作用，闡明胰腺癌通過miRNA途徑影響DC分化和誘導免疫逃逸的分子機制，從而為抑制胰腺癌免疫逃逸，提高胰腺癌免疫治療效果提供新的理論與技術方法。
結題摘要
胰腺癌是臨床常見的消化系統惡性腫瘤，預後極差，五年生存率僅為10%，研究胰腺癌免疫逃逸的分子機制及抑制方法，對胰腺癌早期診斷和預後評估有重要意義。本課題組成功從外周血中分離單核細胞，體外誘導未成熟樹突狀細胞（DC）和成熟DC，利用高通量測序檢測DC分化過程中miRNA表達譜變化，並分析差異表達的miRNA與DC-SIGN的關係。利用生物信息學工具和雙螢光素酶報告實驗篩選並驗證靶向DC-SIGN的miRNA，通過細胞螢光標記實驗證明DC-SIGN在DC與腫瘤細胞粘附中的重要作用，闡明了miR-186在DC分化過程中調控DC-SIGN從而影響DC分化的分子機制。進一步我們採用超速離心的方法分離胰腺癌外泌體（exosome），通過胰腺癌相關miRNA的qPCR陣列檢測實驗，發現胰腺癌細胞分泌的exosomal miRNA可以依靠exosome轉運入未成熟DC中表達，胰腺癌exosome通過miR-212-3p調控RFXAP表達，並顯著下調腫瘤微環境中MHC II類分子表達。同時胰腺癌exosome通過miR-203調控DC TLR4的表達水平，降低腫瘤壞死因子α（TNF-α）及白介素12（IL-12）的水平，繼而影響DC的分化和抗原遞呈功能。另外，胰腺癌患者的血清exosomal miR-17-5p表達水平對胰腺癌的預後判斷以及手術適應徵的選擇具有非常重要的價值。本課題從分子生物學、細胞生物學和臨床醫學等多個角度闡明了miRNA在胰腺癌免疫逃逸、早期診斷及預後判斷中的作用，為胰腺癌免疫治療及診斷提供了新的理論與技術方法。
