肺結核證候分型血清蛋白質指紋圖譜研究

《肺結核證候分型血清蛋白質指紋圖譜研究》是依託浙江大學，由李繼承擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：肺結核證候分型血清蛋白質指紋圖譜研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：李繼承
• 項目類別：面上項目

項目摘要

耐藥肺結核病的高發是我國肺結核病防治最突出的難點。中西醫結合治療耐藥肺結核具有一定優勢，但中醫仍存在證侯分型不統一，辨證未量化的瓶頸，嚴重限制肺結核病中西醫結合療效的提高和臨床推廣套用。基於前期研究的基礎，本課題套用基質輔助雷射解吸附電離飛行時間質譜技術（MALDI-TOF-MS），研究肺結核中醫治療方案中最具代表性的證候四型分法，繪製肺結核不同證候的差異性血清蛋白質指紋圖譜。篩選出能反映肺結核證候分型的標誌蛋白質峰，建立肺結核證候分型血清蛋白質指紋圖譜診斷模型。經臨床雙盲試驗，研究該診斷模型的特異性與敏感性，評估其作為傳統中醫辨證四診之外的，新的輔助性證候分型分子診斷方法的可行性，指導臨床辨證，提高中西醫結合防治肺結核療效。本課題首次套用MALDI-TOF-MS技術，建立肺結核證候分型的血清蛋白質指紋圖譜模型，為闡明中醫證候的生物學本質，奠定了理論基礎和科學依據。

結題摘要

目前用於肺結核病治療的西藥雖然有效但毒副作用大，且易形成耐藥性。而中西醫結合治療肺結核具有一定優勢，但中醫證侯分型不統一，辨證未量化，嚴重限制了中西醫結合治療肺結核病的臨床推廣套用。本課題研究肺結核中醫治療方案中最具代表性的證候三型分法，繪製肺結核不同證候的差異性血清蛋白質指紋圖譜，並篩選能反映肺結核證候分型的標誌蛋白質峰。肺陰虛證與陰虛火旺和氣陰兩虛證比較均存在差異的蛋白峰有12個(P<0.001)，陰虛火旺證與肺陰虛和氣陰兩虛證比較均存在差異的蛋白峰有12個(P<0.001)，氣陰兩虛證與肺陰虛證和陰虛火旺證比較均存在差異的蛋白峰有34個(P<0.001)；有7個蛋白峰在三證間的含量呈肺陰虛→陰虛火旺→氣陰兩虛逐漸降低變化。研究套用BPS軟體建立肺結核證候分型血清蛋白質指紋圖譜診斷模型，以三證候間兩兩有差異的74個差異峰(P<0.001)為基礎構建了由3961.7、4679.7、5646.4、8891.2、9416.7 m/z 5個蛋白標誌峰組成的肺結核中醫證候蛋白質指紋圖譜辨證模型，對於肺陰虛證、陰虛火旺證和氣陰兩虛證辨證的準確率分別為為74.0%、72.5%和96.7%。並經臨床雙盲試驗，該模型對於肺結核三證候的分型具有較好的鑑別能力，對於肺陰虛證辨證的準確率為76.2%，對於陰虛火旺證的準確率為70.8%，對於氣陰兩虛證的準確率為80.0%。對篩選到的蛋白差異峰進行了鑑定和抗體晶片的驗證，結果表明9416.7 m/z蛋白峰是apolipoprotein C-III 載脂蛋白C-III中的一段多肽。本課題首次套用SELDI-TOF-MS、MALDI-TOF-MS技術，建立肺結核證候分型的血清蛋白質指紋圖譜模型，為闡明中醫證候的生物學本質，奠定了理論基礎和科學依據。