肝纖維化中整合素αvβ3表達的MR分子成像實驗研究

《肝纖維化中整合素αvβ3表達的MR分子成像實驗研究》是依託上海交通大學，由汪登斌擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：肝纖維化中整合素αvβ3表達的MR分子成像實驗研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：汪登斌
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

肝纖維化是許多慢性肝臟疾病的共同轉歸，是肝硬化、肝癌等必經病變過程。肝星狀細胞（hepatic stellate cell, HSC）在肝纖維化發生、發展中起關鍵作用。一旦HSC被激活，合成、分泌大量膠原，細胞外基質合成與降解失去動態平衡，形成肝纖維化。肝穿刺活檢仍為肝纖維化早期診斷及其分期的金標準，但其具有創傷性、採樣不全面、併發症較多等缺點，而非侵入性方法仍處於研究階段。研究證明，活化的HSC整合素αvβ3表達尤為顯著，而肝臟其他細胞無明顯表達。本項目擬將USPIO納米粒子與整合素αvβ3的配體RGD多肽偶聯成為靶向HSC的新型特異性納米探針，並在探針中嵌入PEG以增加循環時間、降低Kupffer細胞對探針的吞噬。擬採用此探針對大鼠肝纖維化模型進行MR分子成像研究，探索其早期檢測肝纖維化、評估分期及治療療效方面的能力，有望為肝纖維化中HSC為靶標的細胞特異性治療提供輸送載體和評估手段。

結題摘要

肝星狀細胞（Hepatic stellate cell, HSC）的活化是肝纖維化發生與發展的關鍵環節。目前研究證實活化的HSC顯著表達整合素αvβ3受體，而正常的肝血管內皮細胞及肝細胞幾乎不表達該受體。同時，實驗動物水平研究顯示隨著肝纖維化的轉歸，活化的肝星狀細胞明顯減少。因此，提出整合素αvβ3受體表達情況與肝纖維化的進展及轉歸密切相關的構想。本研究以偶聯精氨酸-甘氨酸-天門冬氨酸小肽（Arg-Gly-Asp, RGD）的超小型超順磁性氧化鐵納米顆粒（Ultra small superparamagnetic Iron Oxide, USPIO）形成分子探針，以HSC為體外驗證細胞，以CCl4誘導的大鼠肝纖維化模型為在體驗證平台，將體外和體內HSC的αvβ3受體作為靶標，以氯沙坦進行抗肝纖維化治療療效模型，以3.0T MRI為成像平台。在體和體外評估分子探針與整合素αvβ3受體的靶向結合情況，進一步動態評估該方法對肝纖維化分期和抗肝纖維化治療療效的可行性，並通過Western blot、real time PCR、免疫螢光和透射電鏡等方法驗證相關結果。結果顯示：體外RGD-USPIO與培養的大鼠肝星狀細胞具備靶向結合能力；體內研究顯示：隨肝纖維化的進展，整合素αvβ3受體表達量增多，肝纖維化不同階段，其表達的整合素αvβ3受體不同，而經氯沙坦抗肝纖維化治療後，整合素αvβ3受體表達量減少，通過RGD-USPIO的MR分子成像能夠監測該靶點表達量的變化。因此，本研究認為基於RGD-USPIO的MR分子成像方法為非侵入性評估纖維化的分期和抗肝纖維化治療療效提供可能，具備潛在臨床套用前景。