《肝細胞MEN1/Sirt1調控NAFLD相關肝細胞癌發生的關鍵作用》是依託上海交通大學，由封明軒擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：肝細胞MEN1/Sirt1調控NAFLD相關肝細胞癌發生的關鍵作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：封明軒
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
代謝異常和衰老導致的NAFLD日益成為肝癌的重要風險因素。肝細胞內特定抑癌基因是代謝異常和肝臟腫瘤發生之間的關鍵調控者。我們前期發現肝細胞內抑癌基因MEN1維持肝臟脂代謝平衡並隨著衰老而減少，肝細胞特異MEN1敲除小鼠（LMKO）發生NAFLD並在老年自發肝癌。長壽基因Sirt1是MEN1調節脂代謝的重要相互作用分子，並能抑制腫瘤發生。因此我們推測MEN1/Sirt1協同維持肝臟代謝平衡抑制腫瘤發生，擬通過LMKO小鼠模型表型研究及大樣本臨床分析明確MEN1在肝癌發生中作用；並基於前期RNAseq結果，探索MEN1/Sirt1通過直接組蛋白去乙醯化或抑制β-catenin活性調控脂代謝通路關鍵因子SCD1和軸突導向通路關鍵因子Ephrins的精確機制；旨在闡明MEN1對肝癌發生的關鍵作用機制，從分子水平解釋衰老、脂代謝異常和腫瘤發生之間的關鍵聯繫，為防治NAFLD相關肝癌提供新的干預靶點。
結題摘要
近年來我國非酒精性肝臟脂肪病變（nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD）的發生率迅速增長，成為肝臟惡性腫瘤發生的重要基礎病變。肝臟作為脂代謝的中心環節，是代謝異常的主要受累器官從而發生NAFLD。肝臟歷經早期肝臟脂肪變性、加重至脂肪性肝炎（NASH），最終發展為肝硬化乃至肝癌，並在50歲至75歲達到肝臟腫瘤的高發期。MEN1表達蛋白Menin是重要的內分泌系統腫瘤抑癌蛋白並被發現能調控肝臟脂肪代謝並參與衰老過程。本研究從MEN1基因調節肝臟脂代謝的角度出發，研究肝細胞內MEN1表達對肝臟NAFLD的發生進而誘發肝腫瘤的作用及其潛在分子機制。研究使用Cre/loxP系統建立肝臟特異性Men1敲除鼠，通過和年齡匹配對照小鼠對比研究MEN1對肝臟腫瘤發生的影響。另外對大樣本肝癌樣本進行MEN1的免疫組化染色分析MEN1在肝中的臨床意義。最後，在分子水平研究MEN1影響肝腫瘤發生的機制。肝臟特異MEN1敲除小鼠的肝臟在16個月後發生明顯的脂肪肝表現，此表型能被MEN1轉染再表達所部分逆轉。在小鼠生長至20-24月之間肝臟出現結節樣改變，至24個月時肝臟腫瘤發生率達到61%以上，且對小鼠壽命產生顯著影響；臨床分析中，MEN1的表達隨著年齡增大呈現一定的下降趨勢，但脂肪肝中的MEN1表達明顯降低。在肝癌中，MEN1的表達和腫瘤大小、肝損程度呈顯著相關性，和腫瘤遠處轉移無顯著相關性。MEN1表達水平和預後相關，且這種差異在年輕（年齡小於50）患者中不顯著，在老年患者組中明顯存在。基於前期RNA-seq對MEN1敲除後的差異表達基因分析，SCD1，這一已知促進腫瘤增殖的基因在MEN1敲除後表達顯著升高，在證明MEN1/Sirt1存在相互作用後，通過Ch-IP實驗成功發現了SCD1啟動子區域存在SIRT1的結合序列，且MEN1和Sirt1的複合物均能和SCD1啟動子兩處序列的組蛋白H3乙醯基團結合，從而證明了MEN1通過和Sirt1結合調控SCD1的表達水平。本研究基本完成預計計畫，通過體內實驗明確了MEN1對肝癌發生的關鍵作用機制，從分子水平解釋衰老、脂代謝異常和腫瘤發生之間的關鍵聯繫，為防治NAFLD相關肝癌提供了潛在的治療靶點。
