《聽神經病譜系障礙新致病基因NELL2的鑑定和功能分析》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由石力擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：聽神經病譜系障礙新致病基因NELL2的鑑定和功能分析
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：石力
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
聽神經病譜系障礙（ANSD）是一種具有特殊臨床表現的感音神經性聾。近年來隨著對ANSD的認識逐漸深入，臨床病例有增多的趨勢。本課題組收集到了兩個常染色體顯性遺傳性非綜合徵性ANSD家系，但測序結果表明唯一已知的常染色體顯性遺傳性非綜合徵性ANSD致病基因DIAPH3在這兩個家系中未發生突變，提示存在新的基因突變。隨後我們採用外顯子組測序技術發現這兩個家系中存在NELL2基因的錯義突變（C457F），提示NELL2突變可能會導致非綜合徵性ANSD。本項目擬構建NELL2突變基因敲入小鼠，檢測發育過程中NELL2在聽覺通路的表達變化規律及突變小鼠內毛細胞、帶狀突觸、聽神經通路的形態學變化，分析NELL2的相互作用分子及其功能，以及NELL2突變對其分子結構的影響，探索NELL2突變導致ANSD的分子機制，期望為ANSD的遺傳學檢測、產前診斷及新生兒篩查等提供實驗依據。
結題摘要
聽神經病譜系障礙（ANSD）是一種具有特殊臨床表現的感音神經性聾。近年來隨著對ANSD的認識逐漸深入，臨床病例有增多的趨勢。本課題組收集到了兩個常染色體顯性遺傳性非綜合徵性ANSD家系，但測序結果表明唯一已知的常染色體顯性遺傳性非綜合徵性ANSD致病基因DIAPH3在這兩個家系中未發生突變，提示存在新的基因突變。隨後我們採用外顯子組測序技術發現這兩個家系中存在NELL2基因的錯義突變（C457F），提示NELL2突變可能會導致非綜合徵性ANSD。本項目構建NELL2突變基因敲入h和敲除小鼠模型，結果發現：（1）成功建立NELL2基因敲除和突變敲入小鼠模型，分別對耳蝸毛細胞和支持細胞條件性敲除NELL2基因。（2）我們研究首次發現基因敲除及突變基因敲入小鼠可導致聽力學改變，ABR聽閾均較對照組明顯提高，DPOAE檢測未見明顯異常。（3）首次發現NELL2基因在小鼠耳蝸主要表達在毛細胞、螺旋神經元和部分支持細胞，可能和聽覺發育成熟有關。（4）通過酵母雙雜交技術，篩查出NELL2基因相關蛋白，並通過細胞學研究發現NELL2基因與細胞內質網高度重合，可能參與調控內質網蛋白合成和代謝。（5）散發聽神經病譜系障礙患者存在19種NELL2基因突變，其中16種位於內含子區域，有3種位於外顯子區域並可能致病。進一步證實NELL2基因突變可能是聽神經病譜系障礙致病基因之一。
