《群體感應信號肽介導的戊糖乳桿菌產細菌素機制研究》是依託中國農業大學，由李平蘭擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：群體感應信號肽介導的戊糖乳桿菌產細菌素機制研究
- 依託單位：中國農業大學
- 項目負責人：李平蘭
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
戊糖乳桿菌（Lactobacillus pentosus ）31-1分泌細菌素表現出強烈的群體密度依賴效應，初步確定信號肽是調控的關鍵。本項目在完善戊糖乳桿菌發酵液中信號肽分離純化程式基礎上，採用質譜(MS)、圓二色譜(CD)、核磁共振（NMR）及X-射線衍射(X-ray)技術，明確信號肽分子量、胺基酸序列及空間結構等分子特性；通過基因敲除，構建組氨酸蛋白激酶（Histidine Protein Kinase, HPK）基因和感應調節蛋白（response regulator protein，RR）基因缺失突變株，在低於感應密度條件下，觀測hpk-rr雙基因敲除前後信號肽誘導效應的變化，研究信號肽與HPK-RR的相互關係，闡解戊糖乳桿菌產細菌素機制。研究結果對於從分子水平全面解析戊糖乳桿菌群體感應系統以及實現細菌素的高效表達具有重要的科學意義。
結題摘要
本課題通過硫酸銨鹽析、超濾、疏水層析、凝膠層析和RP-HPLC步驟對戊糖乳桿菌31-1的群體感應信號肽進行了純化，用MALDI-TOF質譜測定純化後的小肽AIP的分子量為2985.16 Da，並用EDMAN降解法測得其N端前15個胺基酸序列為：NH2-KSSAYSLQMGATAIK。用組氨酸蛋白激酶抑制劑——氯氰碘柳胺驗證了戊糖乳桿菌群體感應信號肽分子功能。通過插入失活方法構建了組氨酸蛋白激酶編碼基因敲除突變株，研究了該基因失活對細菌素合成的影響，對信號肽誘導作用的影響，闡解了群體感應調控機制。
