總谷胱甘肽測定試劑盒的測定原理是:試劑盒中含有DTNB:5,5’–二硫代–雙–(2–硝基苯甲酸),能和谷胱甘肽(GSH)反應產生2–硝基–5–巰基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG),由於2–硝基–5–巰基苯甲酸是一黃色產物,通過測定其在412 nm處的最大吸收可確定樣品中谷胱甘肽的含量。GSSG在谷胱甘肽還原酶作用下生成GSH,GSH又和DTNB作用生成2–硝基–5–硫基苯甲酸,利用這一循環反應可提高總谷胱甘肽測定的靈敏度。
基本介紹
- 中文名:總谷胱甘肽測定試劑盒
- 存在於:動物組織植物組織微生物和酵母
- 特點1:適合於比色分析;
- 特點2:靈敏度高;
簡介,用途,
簡介
谷胱甘肽(GSH)是一種硫醇(SH)化合物,它廣泛存在於動物組織、植物組織、微生物和酵母中。
總谷胱甘肽測定試劑盒含有多種試劑,測定總谷胱甘肽含量濃度範圍:1μM-100μM。
反應原理: (如圖)
總谷胱甘肽濃度的計算使用以下公式(a):
pseudo-end point法:
總谷胱甘肽=(O.D.sample-O.D.blank)/Slope(b)
kinetic法:
總谷胱甘肽=(Slope(c)sample- Slope(c)blank)/ Slope(b)
*(a)由於這個公式所得數值是處理後的樣品中總谷胱甘肽的量,如果需要知道細胞或組織中實際具體的谷胱甘肽的濃度,還需要做進一步的計算。由pseudo-end point法或kinetic法所製備的標準曲線的斜率。
(b)標準曲線的斜率
(c)kinetic反應的斜率
特點:
1、適合於比色分析;
2、可測定總谷胱甘肽(GSH+GSSG);
3、靈敏度高;
4、快速、省時,整個實驗可在30分鐘內可完成。
用途
可用於檢測細胞、組織、血漿、血清、紅血球、植物等樣品中的GSH;另外在樣品中加入triethanolamine和2-vinylpyridine,可單獨檢測二硫代谷胱甘肽(GSSG)的量。