《線粒體肽NDDP4抑制卵巢癌惡性增殖機制及靶向阻遏研究》是依託華中科技大學，由高慶蕾擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：線粒體肽NDDP4抑制卵巢癌惡性增殖機制及靶向阻遏研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：高慶蕾
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
21世紀腫瘤代謝成為腫瘤研究的新熱點，而執行著細胞代謝、呼吸和凋亡三大功能的細胞器- - 線粒體與腫瘤的研究成為新的熱點及難點。申請人赴美國加州大學UCLA深入研究了線粒體與腫瘤的關係，提出了線粒體肽的概念，成功地篩選出了線粒體凋亡肽，進而提出細胞內可能存線上粒體因子的科學假說，並巧妙地與前期工作中自主創新構建的選擇性複製溶瘤腺病毒基因載體的研究成果相結合，從核外遺傳物質線粒體DNA編碼的未知小分子肽出發，從線粒體功能異常與腫瘤的獨特視角，以線粒體凋亡肽NDDP4為切入點，以困擾臨床治療實際的卵巢癌殘留/轉移灶為突破口，深入探討NDDP4抑制卵巢癌惡性增殖的機制，並引入線粒體功能分析技術和選擇性複製溶瘤病毒構建技術，從套用角度出發探索一條有效清除卵巢癌殘留/轉移病灶的靶向基因免疫治療新途徑，從而達到探索腫瘤轉移治療新方法、解決腺病毒基因治療關鍵技術障礙，最終實現靶向遏制腫瘤復發和轉移的目的。
結題摘要
線粒體作為執行細胞代謝、呼吸和凋亡三大功能的細胞器，其與腫瘤的研究是當代國際腫瘤研究領域新的熱點及難點。腫瘤患者線粒體的活性及保守性均發生改變，但線粒體異常與腫瘤究竟有無關聯？線粒體肽是否就是線粒體因子？能否利用線粒體肽的特點及其凋亡誘導作用，從而指導臨床對卵巢癌更加高效、特異的抗腫瘤治療？ 基於前期研究提出的線粒體肽的概念，本項目利用美國seahorse海馬細胞能量代謝實時測定儀等，在對ND-1所編碼的5個線粒體肽進行功能分析後，成功地篩選出了線粒體凋亡肽NDDP4。它能引起Caspase-3和9活化，剪下底物產生cleaved PARP蛋白，從而引發以線粒體為核心的內源性細胞凋亡。基因晶片分析提示NDDP4可能是TNF超家族的新成員。在聯合生物抗體公司製備針對NDDP4抗原的高純度特異性抗體後，用131I標記His/NDDP4多肽，使用Pulldown技術結合質譜等方法，我們證實NDDP4通過與細胞表面DR3結合進而連線接頭蛋白的死亡結構域，通過激活Caspase-8誘導外源性細胞凋亡。另一方面，我們建立並最佳化針對NDDP4的in-house-Elisa檢測體系，檢測它在正常卵巢和卵巢癌患者血漿和體液中的表達及不同種屬組織器官的分布，證明了NDDP4是線粒體因子可能性。針對卵巢癌的治療，我們結合自主創新構建的選擇性複製溶瘤腺病毒基因載體，構建以NDDP4為靶點的Adv5/dE1A-NDDP4（M9），通過caspase凋亡通路，骨髓間充質幹細胞運載複製型M9選擇性的殺傷卵巢癌細胞，而對正常細胞無殺傷作用，從而抑制卵巢癌惡性增殖。 本項目從套用角度出發探索一條有效清除卵巢癌殘留/轉移病灶的靶向基因免疫治療新途徑，從而達到探索腫瘤轉移治療新方法、解決腺病毒基因治療關鍵技術障礙，為最終實現靶向遏制腫瘤復發和轉移的目的提供理論支持。在項目執行期內，經費使用合理，除完成既定目標外還充實了研究內容，為所在實驗室開創了選擇性複製溶瘤腺病毒靶向基因載體構建的新的技術平台。研究結果已發表SCI論文8篇。
