線性擴增技術

線性擴增技術是一種RNA的擴增技術,主要是通過將微量RNA通過體外轉錄線性化擴增予以放大,然後用於進行晶片雜交或繼續基因表達分析。

基本介紹

  • 中文名:線性擴增技術
  • 技術要點:實驗過程包括RT反應
  • 樣品要求: Total RNA 大於 100ng
將微量RNA通過體外轉錄線性化擴增予以放大,這種信號放大不改變各基因在原始樣本中的組成比例,通過RNA線性放大實驗,讓您可由此取得高品質及足量的cRNA,然後用於進行晶片雜交或繼續基因表達分析。
技術要點:
1、 實驗過程包括RT反應、IVT反應等。
2、 具有處理微量RNA的能力,最少可接受100ng Total RNA 或 10ng mRNA 的量。
3、 RNA 每次放大200-1,000 倍,成品約2mg cRNA。
4、 由於放大過程比較繁瑣,在整個操作過程中,異源核酸的污染常會造成非特異結果。 對於RT-PCR來說,還要注意防止RNase及DNA的污染。這些都需要良好的操作環境及工作人員的實踐經驗。
樣品要求:
1、 Total RNA 大於 100ng。
2、 mRNA 大於 10ng。
3、 樣品需以足量乾冰運送,以確保溫度需維持在-70℃— -80℃。
4、 通過 Lab-on-chip 嚴格質控高質量的樣品RNA。

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